枸杞糖肽对缺氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响

Effects of lycium barbarum glycopeptide on the intracellular free calcium concentration of cardiomyocytes in neonatal hypoxia mice

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摘要目的:研究低氧心肌细胞内游离钙([Ca2+]i)浓度的变化,枸杞糖肽减轻缺氧诱导的心肌细胞钙超载以及对缺氧心肌的保护作用.方法:实验选用出生两三天的SD乳大鼠80只进行心肌细胞培养,建立心肌缺血模型,实验分3组:对照组;缺氧组:细胞缺氧6 h;枸杞糖肽组:先加入终浓度为50 mg/L的枸杞多糖,再行缺氧6 h.以Fluo/AM荧光指示剂负载,通过激光扫描共聚焦显微系统和Flou-3/AM荧光指示剂标记技术,观察枸杞糖肽对缺氧心肌细胞游离钙含量的影响.结果:心肌细胞经缺氧处理6 h后,细胞之间相互连接减少,大部分细胞肿胀,折光性减弱,部分细胞甚至呈圆形,少部分细胞胞膜破裂,提示心肌细胞损伤.枸杞糖肽处理组心肌细胞经缺氧后,可见部分细胞肿胀,内有颗粒,折光性减弱,但较缺氧模型组有一定的改善作用.心肌细胞Fluo-3/AM负载后在激光共聚焦显微镜下观察,细胞的分布和外形与倒置显微镜下所见相符,呈不规则棱形、多角形、星形细胞,轮廓清晰,成群的细胞出现自发性,同步性、有节律的搏动.经Flu3-AM标记后,细胞出现规律性闪烁.对照组心肌细胞[Ca2+]i荧光强度和吸光度(A值)较低,缺氧6 h荧光强度明显增加(P＜0.05);枸杞糖肽组心肌细胞[Ca2+]i荧光密度(62.86±28.71)低于缺氧组(156.76±55.39)(P＜0.01).结论:低氧导致心肌细胞钙超载,而枸杞糖肽能减轻钙超载.