换一批体外耳蜗切片观察外毛细胞形态结构及其电生理特征
Cochlear slices technique in vitro for observing the morphologic structure and electrophysiological characteristics of outer hair cells
摘要目的:离体耳蜗切片技术能完整保持耳蜗内部高度分化组织的结构及其功能特点,并用全细胞膜片钳记录,可同时了解构成柯蒂氏器各种细胞的电生理特性及相互联系.方法:实验于2003-05/12在解放军第三军医大学生理学教研室完成.5～14 d龄Wister大鼠30只,常规乙醚麻醉后,断头并迅速取出两侧耳蜗置于冷却的体积分数为0.95的氧气+体积分数为0.05的二氧化碳饱和的人工外淋巴液中约5 min,经灌入4℃溶于外淋巴液的Pluronic F127后切成厚400～600 μm薄片.取结构较完整的切片室温下孵育约1 h,盲法膜片钳行全细胞记录.记录的细胞经biocytin染色,确定细胞类型.结果:参加实验动物30只,10只大鼠制备切片失败,其余20只大鼠进入统计分析.8～14 d龄大鼠切片的成功率较高,全细胞记录后其中2只经biocytin染色证实为外毛细胞,其具有外向整流特性的K+电流,这说明切片组织的活性较好.但由于条件限制,目前还未获得有关柯蒂氏器内螺旋神经元、内毛细胞、盖膜上皮细胞及支持细胞等记录.结论:离体耳蜗切片技术能够较完整的保持耳蜗内柯蒂氏器的结构及各种构成细胞的活性与相互之间的联系,避免了耳蜗及其所在位置结构复杂给在体研究其声音转导与神经传递带来的困难.
更多相关知识
- 浏览392
- 被引1
- 下载12
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
