照射抑制成年大鼠海马齿状回神经元再生的实验
An experiment on irradiation-inhibited neuron regeneration in the hippocampal dentate gyrus of adult rats
摘要目的:观察照射对成年大鼠海马齿状回神经元再生的影响.方法:实验于2004-05/2005-04在南方医科大学生理学教研室完成.选择成年雄性Wistar大鼠32只,随机分为对照组和照射组,每组16只.用6MV高能X射线行全脑照射10 Gy后,灌注固定取脑,行组织学检查.照射后12 h,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的切口末端标记法检测海马齿状回凋亡细胞;照射后2个月,用神经巢蛋白免疫组织化学标记计数神经前体细胞,用5-溴脱氧尿苷标记法检测再生神经细胞数量,用5-溴脱氧尿苷与神经特异核蛋白双染法标记再生神经元,计数双染阳性细胞占5-溴脱氧尿苷单染阳性细胞数的比例.结果:32只实验动物照射过程中照射组与对照组因麻醉各死亡1只,30只进入结果分析.①正常大鼠海马齿状回颗粒下层基本无末端脱氧核苷酸转移酶介导的切口末端标记阳性细胞,照射后12 h,可见该区域末端脱氧核苷酸转移酶介导的切口末端标记阳性细胞数量较对照组明显增加,差异有显著性[(0.25±0.46),(42.1±9.6)个/张,P<0.001].②照射后2个月,神经巢蛋白的免疫组织化学标记结果表明,照射组大鼠海马齿状回神经巢蛋白阳性细胞数量与正常对照组接近,差异无统计学意义[(226.0±33.3),(195.0±39.1)个/张,P=0.11].③5-溴脱氧尿苷与神经特异核蛋白双染标记显示,照射组5-溴脱氧尿苷与神经特异核蛋白双染阳性细胞占5-溴脱氧尿苷阳性细胞数比例较对照组显著降低[(12.8±5.0)%,(81.3±6.6)%,P<0.001],表明照射明显抑制再生神经细胞向神经元方向分化.结论:照射可选择性诱导大鼠海马齿状回神经增殖细胞凋亡,照射后2个月神经前体细胞数量无明显减少,而神经前体细胞增殖活性及向神经元方向分化均受到明显阻滞.
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