应用生物素葡聚糖胺顺行示踪技术探索左右侧脊神经节间纤维的联系
Studies on connections between left and right spinal ganglions with biotin dextran amine-anterograde labeling technique
摘要目的:对大鼠左、右侧脊神经节间纤维的联系进行探求,以寻找两侧脊神经节(背根节)的神经元交互支配这一电生理学现象的形态学基础.方法:①实验于2005-01/05在首都医科大学解剖学实验室完成,选用7~8周龄健康Wistar大鼠14只,动物编号RBL 1~14.将大鼠按编号分为3组:左侧坐骨神经或股神经注射组(动物编号RBL 1~4,n=4)、左侧脊神经节注射组(动物编号RBL 5~10,n=6)、脊髓左侧注射组(动物编号RBL 11~14,n=4).②麻醉大鼠,手术寻找到注射部位,在左侧坐骨神经或股神经注射组大鼠左侧坐骨神经或股神经、左侧脊神经节注射组在左侧脊神经节(第3或第4腰节)、脊髓左侧注射组在腰髓(第3或第4腰椎)左后外侧沟注射100 g/L的神经束路顺行示踪剂生物素葡聚糖胺1.0~2.0μL.③左侧坐骨神经或股神经注射组的实验动物(RBL 1~4)存活9~10 d;左侧脊神经节注射组分别存活9~10 d(RBL 5~8)和15 d(RBL 9~10);脊髓左侧注射组RBL 11~14存活6 d.④存活期满后,麻醉大鼠,借助灌注泵经升主动脉灌杀动物,取出脊髓腰骶膨大部(第13胸髓至第6腰髓)及双侧3对神经节(注射节及其上下各1节),进行固定.脊髓为横切、神经节按长轴方向作连续水平冰冻切片.采用图像分析仪光镜下观察并照像.结果:大鼠14只均进入结果分析.①一侧脊神经、脊神经节注射生物素葡聚糖胺的动物,其脊髓相应节段的双侧背角、灰质后连合及腹角均可见生物素葡聚糖胺标记的阳性反应,但注射侧染色明显强于非注射侧;脊神经节生物素葡聚糖胺标记阳性反应(除存活15 d动物外),一般仅见于注射侧;存活15天的动物,神经节生物素葡聚糖胺标记阳性反应则两侧相似.②在脊髓一侧注射生物素葡聚糖胺的动物,其两侧神经节也均有生物素葡聚糖胺标记阳性反应,但注射侧更为显著.结论:一侧背根节细胞的中枢突可达到两侧后角,是否能直接到达对侧脊神经节尚有待进一步实验观察.
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