玉竹提取物A对小鼠单核细胞体外诱生血栓素B2分泌量的影响
Influence of extraction A of polygonatum odoratum on the secretion of in vitro induced thromboxane B2 in the monocytes of mice
摘要目的:观察小鼠单核细胞在体外经内毒素刺激分泌血栓素B2的情况,及不同浓度玉竹提取物A对其分泌量的影响.方法:实验于2004-06/2004-08在锦州医学院免疫实验室进行.选择普通级健康雄性昆明小鼠36只,随机分为正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A 500mg/L组、玉竹提取物A 1 000 mg/L组、玉竹提取物A 1500mg/L组,玉竹提取物A 2 000mg/L组共6组,每组6只.36只小鼠摘眼球取血,分离外周血单核细胞,分置24孔培养板中,每孔 0.5 mL.每组设6个平行孔,大肠杆菌内毒素为终浓度.正常对照组每孔加完全1640 0.5 mL;模型对照组同样每孔加完全1640 0.5 mL;同时4个实验组的单核细胞内分别加入相应浓度的玉竹提取物A;另取两个24孔培养板,每孔只加单核细胞悬液1 mL.上述分离之单核细胞培养3 d后换液1次,除正常对照组外,将10 mg/L的大肠杆菌内毒素10μL加入其余5组,共育2 h;同时取只加单核细胞悬液的后两板,每组加大肠杆菌内毒素浓度分别为0.01,0.1,1,10,100,400mg/L,各10μL,共育2 h.然后收集每孔上清液,放免分析法测定上清液中血栓素B2含量.观察体外给予不同浓度大肠杆菌内毒素,对血栓素B2分泌量的影响;不同浓度玉竹提取物A对同一浓度大肠杆菌内毒素刺激的血栓素B2分泌量的影响.结果:36只小鼠均进入结果分析.①大肠杆菌内毒素维持在0.01,0.1,1,10 mg/L时,其刺激小鼠外周血单核细胞合成血栓素B2水平呈剂量依赖关系,即随大肠杆菌内毒素浓度增加,血栓素B2合成水平亦升高(800,950,1 180,1 500 ng/L),大肠杆菌内毒素为10 mg/L时,刺激血栓素B2合成速率达峰值;当内毒素刺激量增至100,400 mg/L时,血栓素B2合成水平不再升高,而呈下降趋势(1 100,900ng/L).②当用10 mg/L的大肠杆菌内毒素分别刺激除正常对照组外的其余5组的单核细胞时,模型对照组血栓素B2分泌量明显高于正常对照组[(1 382±98),(823±78)ng/L,t=10.93,P<0.01],4个浓度(500,1 000,2 000,4 000mg/L)玉竹提取物A组血栓素B2的量明显低于模型对照组[(805±75),(812±77),(817±81),(783±70),(1382±98)ng/L,t=11.45,11.20,10.88,12.18,<0.01],与正常对照组(823±78)ng/L无显著差异.结论:内毒素体外可以刺激单核细胞分泌血栓素B2,且刺激量为10 mg/L时,单核细胞合成血栓素B2最旺盛;不同浓度玉竹提取物A体外均可显著抑制血栓素B2的分泌,但随着药物浓度的增大,其抑制作用并未增强.
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