丹参红花提取物保护内皮细胞免受氧化损伤的体外实验
In vitro experiment of danshen root and carthamus tinctorius extract in the protection of endothelial cells from oxidative damage
摘要目的:观察低密度脂蛋白和无血清培养刺激下人脐静脉内皮细胞内活性氧、NOX4 mRNA水平和细胞凋亡的变化,以及丹参红花提取物的干预作用.方法:实验于2005-11/2006-05在卫生部老年医学重点实验室完成.取人新鲜脐带分离培养人脐静脉内皮细胞,分为:①正常对照组.②无血清培养组:用无血清培养基培养24 h.③低密度脂蛋白处理组:以含有800mg/L低密度脂蛋白的培养基培养16 h.④丹参红花提取物预处理组:用丹参红花提取物(商品名丹红滴注液,由陕西步长集团提供浓缩液,国药准字号Z 20026866/Z 20026867)预处理24 h后加入800 mg/L低密度脂蛋白继续培养16 h或在无血清培养基中培养24 h.以MTT法观察丹参红花提取物对人脐静脉内皮细胞生长的影响;应用反转录-聚合酶链反应检测NOX4 mRNA水平;用流式细胞仪分析细胞凋亡率;并以DCFH-DA法检测细胞内活性氧生成量.结果:①低密度脂蛋白处理组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡为正常对照组的1.3倍,1.2倍和4倍.②无血清培养组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为正常对照组的1.4倍、1.6倍和3倍.③丹参红花提取物预处理组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为低密度脂蛋白处理组的0.4倍,0.5倍和0.2倍.④丹参红花提取物组NOX4mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为无血清培养组的0.2倍、0.5倍和0.6倍.结论:丹参红花提取物能够有效抑制高脂及缺血状态下NOX4 mRNA表达水平,从而抑制人脐静脉内皮细胞内活性氧的产生及细胞凋亡,对内皮细胞起到很好的保护作用.
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