换一批构建重组大鼠pEGFP-N1-IGF-1基因表达质粒
Construction of recombinant gene expression plasmid pEGFP-N1-IGF-1 in rats
摘要目的:构建胰岛素样生长因子1基因的真核表达质粒(pEGFP-N1-IGF-1),为基因治疗脊髓损伤提供前提.方法:实验于2005-04/06在上海基康生物公司实验室完成.应用反转录-聚合酶链反应方法从大鼠肝脏组织总RNA中提取并扩增胰岛素样生长因子1基因的全长cDNA,并将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,以构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-1.结果:实验从大鼠肝脏组织中提取总RNA,以反转录-聚合酶链反应方法获取编码胰岛素样生长因子1基因的全序列cDNA.构建胰岛素样生长因子1 cDNA真核表达质粒时将能发出绿色荧光的增强型绿色荧光蛋白报告基因融合在胰岛素样生长因子1基因,并经酶切后DNA电泳鉴定及DNA测序证实.结论:构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-1成功,实验中将能发出绿色荧光的增强型绿色荧光蛋白报告基因融合在胰岛素样生长因子1基因的3'端,并以编码柔软肽段的核苷酸连接,即保留了胰岛素样生长因子1的神经营养活性,又便于基因治疗中可检测到蛋白表达.
更多相关知识
分类号
R394（医学遗传学）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1673-8225.2006.48.045
发布时间
2006-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览243
- 被引4
- 下载1
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
