蚕丝支架韧带材料的机械强度和体外降解性
Mechanical strength and in vitro degradation of a silk scaffold for tissue-engineered ligaments
摘要背景:目前用于组织工程韧带的支架材料胶原蛋白、聚乳酸、聚羟基乙酸、小肠黏膜下层、聚糖及纳米材料等均有降解速度快的特点,应用于宿主后有一定炎症反应.目的:观察蚕丝支架的机械强度和体外降解性,以及与巨噬细胞的反应.设计:对照观察.单位:实验于2004-09/2005-01在华中科技大学附属协和医院骨科完成.材料:市售白色家蚕蚕丝(20/22D),每30根蚕丝平行排列为一束支架.置入煮沸的5g/LNa2CO3中进行脱胶,Na2CO3溶液体积(mL)与生丝的质量(g)之比为1000.方法:①体外降解实验:8cm长蚕丝支架干燥后测初质量,然后分别浸泡于磷酸盐缓冲液和用磷酸盐缓冲液配制的1.0g/L胶原酶中,浸泡12周后测试蚕丝支架残质量,计算失质量率.同时进行拉伸试验,测量样品的极限抗拉强度.②单核细胞株RAW264.7的培养:将丝状支架组、对照组、脂多糖组均加入2×108 L-1巨噬细胞混悬液1mL中培养,培养第1,7天收集各组细胞培养上清,采用ELISA方法测定TNF-α含量.主要观察指标:①丝状支架在磷酸盐缓冲液和胶原酶中失重率和极限抗拉强度变化.②培养第1,7天各组细胞培养上清中TNF-α含量.结果:①丝状支架在胶原酶中8周后质量减少已超过50%,在磷酸盐缓冲液中未见明显改变.②胶原酶消化8周后丝状支架的极限抗拉强度下降超过原来的50%,在磷酸盐缓冲液中未见明显变化.③培养第1,7天丝状支架组巨噬细胞分泌少量TNF-α,脂多糖组上清中的TNF-α水平明显高于丝状支架组(P<0.01),丝状支架组与对照组TNF-α水平无差异(P>0.05).结论:丝状支架经12周降解后仍保持良好机械特性,培养第1,7天与巨噬细胞混合培养中,巨噬细胞对该材料具有免疫惰性.
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