换一批摘要背景:神经干细胞可分化成为神经元或者少突胶质细胞、星形胶质细胞等,但其分离及培养鉴定方法仍有待进一步实验论证.目的:通过检索明确神经干细胞分离、定向培养及鉴定方法.检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1999-01/2005-01与神经干细胞的分离及培养的相关文献,检索词为"neuron stem cells,isolation,culture,differentiation",并限定文章语言种类为English,共检索到51篇文献,对资料进行初审,纳入标准:有关神经干细胞分离和培养的新技术.排除重复性、精确性差及欠严谨的研究.文献评价:文献的来源主要是Pubmed数据库,选择25篇与神经干细胞分离和培养的新技术相关性比较强的文献,其中综述类文章14篇,论著类文章11篇.资料综合:①神经干细胞的分离:包括流式分选法、免疫磁珠法及原代培养法.流式分选法虽可直接获得神经干细胞,但所用试剂和仪器价格昂贵故无法推广;免疫磁珠法可有效地分选细胞,操作简单,分离得到的神经干细胞纯度高,适合于神经干细胞移植;目前多数实验室采用原代培养法,该方法操作简单且经济使用.②神经干细胞的定向培养及鉴定:用胰蛋白酶消化法从人胚脑中分离单个细胞,并用无血清培养基进行体外培养,用碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子刺激细胞生长,应用血清诱导其分化,再利用免疫荧光细胞化学染色方法检测培养的细胞神经巢蛋白抗原和分化后成熟神经细胞抗原神经元特异性烯醇化酶的表达.结论:流式分选法、免疫磁珠法及原代培养法均可作为神经干细胞的分离方法,以原代培养法最为常用;单个神经干细胞可形成克隆球,经免疫组化鉴定呈现出表达阳性,表明分离出的为神经干细胞.
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