小鼠卵巢颗粒细胞适宜培养体系及激素干预的影响
Suitable culture system of mouse ovarian granulosa cells and effect of hormone intervention
摘要背景:建立稳定、高效的颗粒细胞体外培养体系,可了解颗粒细胞体外生长的特点与基本生物学特性.目的:建立并优化小鼠卵巢颗粒细胞原代培养体系,探讨孕马血清促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素对细胞增殖与细胞骨架的影响.方法:分离小鼠卵巢颗粒细胞,分别培养于RPMI1640、HTF与BIO-AMF2培养系统,将分离得到的第3代颗粒细胞培养体系中添加人绒毛膜促性腺激素与孕马血清促性腺激素进行干预.结果与结论:BIO-AMF2培养体系优于RPMI1640、HTF培养体系,原代培养第4天可见细胞汇合成片呈铺路石样生长,颗粒细胞C-kit免疫组化染色呈阳性,细胞周期测定表明体外培养的颗粒细胞大部分处于G1期.在颗粒细胞培养后第2天,激素对颗粒细胞的增殖即显现促进作用,在第4天最为显著,但未发现激素对颗粒细胞的细胞形态与细胞骨架有显著影响.
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