换一批
换一批人骨髓间充质干细胞的体外培养、鉴定及成骨分化
In vitro culture, identification and osteogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells
摘要背景:国内外对骨髓间充质干细胞的体外成骨诱导分化研究手段、测定指标均不够全面.目的:建立并完善一整套人骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定方法,探讨其体外成骨分化能力.方法:采用密度梯度离心法分离培养人骨髓间充质干细胞,流式细胞仪鉴定细胞表面表型.传至第3代时更换成骨诱导培养基进行成骨分化诱导.结果与结论:人骨髓间充质干细胞生长旺盛,传代后增殖旺盛,第3代骨髓间充质干细胞表面表型CD44、CD73、CD90表达阳性,CD34表达阴性.诱导后的成骨细胞碱性磷酸酶活性增加,Gomori、Von kossa、茜素红染色均阳性.RT-PCR检测诱导后细胞有Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、骨钙素、骨唾液酸蛋白、骨桥蛋白及骨连接蛋白基因的表达,证明了人骨髓间充质干细胞成功向成骨方向分化.表明实验建立了一整套稳定、成熟的骨髓间充质干细胞分离、培养、扩增方案.
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