生物反应器体外构建组织工程化尿路肌性管腔

Constructing a tissue-engineered muscular conduit of urinary tract in bioreactor

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摘要背景：理想的组织工程尿道替代物应具有良好的力学特性，足以承受长时间的尿液排泄冲击，而静态培养的尿路肌性管腔强度不佳。已有研究表明，力学刺激能够促进细胞生长和细胞外基质的分泌。目的：探讨生物反应器内构建组织工程化尿路肌性管腔的可行性。方法：酶消化法获取脂肪干细胞，经体外培养和扩增后，流式细胞技术检测细胞表面抗原，将脂肪干细胞接种于聚羟基乙酸上，形成细胞-材料复合物，体外培养1周后，将其置于生物反应器内培养，实验组予以动态力学刺激培养；对照组为静态培养，先采用基础培养基培养3周，而后用成肌诱导培养液诱导4周，行大体观察及组织学检测。结果与结论：流式细胞仪检测细胞表面CD90，CD44，CD105表达率分别为99.42%，98.12%，93.27%；CD34，CD45表达率分别为4.92%和0.38%，实验组培养的肌性管腔色泽明亮，管腔圆润，免疫组化染色显示，细胞材料复合物在诱导4周后，细胞表达结蛋白和α-平滑肌肌动蛋白阳性，细胞材料复合物胶原成分多。对照组构建的肌性管腔色泽暗淡，管腔轻度塌陷，细胞材料复合物胶原成分较少。提示脂肪干细胞复合聚羟基乙酸材料在生物反应器内动态培养可构建具有良好结构的尿路肌性管腔。