成肌细胞体外培养-力学刺激模型与周期性张应力的影响

Effects of cyclic stretch on in vitro culture-tensile stimulation models of myoblasts

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摘要背景：内质网应激参与多种疾病的发生发展过程，如动脉粥样硬化、糖尿病、阿尔茨海默病，GRP78是内质网应激的标志蛋白，GRP78的表达水平反映内质网应激的程度。<br>　　目的：研究周期性张应力对 L6大鼠成肌细胞 GRP78表达的影响，以明确周期性张应力与内质网应激的关系。<br>　　方法：在成功构建L6大鼠成肌细胞体外培养力学刺激模型的基础上，采用RT-PCR和Western blot法分析周期性张应力对GRP78 mRNA和蛋白表达的影响。加力组分别给予1，6，12，24 h的力学刺激，加载频率为10 cycles/min，拉伸变形幅度为15%。对照组与实验组在同时种板，不给予力刺激。<br>　　结果与结论：GRP78 mRNA随着加力时间的延长呈一致上升趋势，与对照组相比，差异均有显著性意义(P<0.05)；GRP78蛋白在加力1 h后，蛋白表达量开始升高，加力6 h后蛋白表达量显著升高，到24 h达到峰值，与对照组相比，差异均有显著性意义(P<0.05)。由以上结果得出，在一定时间范围内，周期性张应力可引起内质网应激，并且随着时间的延长逐渐增强；持续的应力刺激，可引起严重的内质网应激导致成肌细胞凋亡。