换一批摘要背景：干细胞培养基，尤其是乳腺干细胞培养基现阶段尚无有效的制备方法。目的：利用Sca-1+乳腺细胞验证自制乳腺干细胞培养基的有效性。<br> 方法：用BM培养基培养乳腺器官样小体，6 d后以免疫荧光方法监测成纤维细胞Sca-1和vimentin的表达。筛选出MaECM培养基，培养乳腺细胞6 d后，免疫磁珠筛选Sca-1+和Sca-1-细胞群，流式细胞术分析Sca-1阳性细胞的纯度，1×104 Sca-1+或Sca-1-细胞种植在4只鼠双侧乳腺脂肪垫上，6-8周后取出乳腺脂肪垫，以卡红整体染色和苏木精-伊红染色分析长出乳腺的结构数量。<br> 结果与结论：乳腺器官样小体用BM培养基培养6 d后，检测到大量Sca-1和vimentin阳性的成纤维细胞，说明BM培养基不适合分离Sca-1+乳腺干细胞。筛选出的MaECM培养基能够抑制成纤维的生长。磁珠筛选后，流式细胞术检测Sca-1+细胞在Sca-1+和Sca-1-细胞群的纯度分别是92%和5%。移植实验显示在8个种植Sca-1+细胞的脂肪垫生长出6个乳腺结构；而在8个种植Sca-1-细胞的脂肪垫中除1只鼠死亡，其余脂肪垫中均未长出乳腺结构。提示MaECM培养基适用于培养鼠乳腺干细胞。
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关键词
干细胞培养乳腺干细胞成纤维细胞Sca-1乳腺干细胞培养基国家重大科学研究计划(973)资助项目863项目stem cellsbreast neoplasmsfibroblastsculture mediafluoroimmunoassay
分类号
R394.2（医学遗传学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-4344.2014.10.017
发布时间
2014-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点基础研究发展计划（973计划）（973）
资助项目（2011CB964900）
国家高技术研究发展计划（863计划）（2011AA020100）
河北省教育厅青年基金（2011154）
邢台市科技支撑计划（2013ZC062）
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