人脱落乳牙干细胞骨向分化相关分子Runx2的动态表达

Dynamic expression of Runx2 gene profile during osteogenesis in stem cells from human exfoliated deciduous teeth

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摘要背景：Runx2被认为是成骨基因表达的主要调节因子，是一种向成骨细胞分化的不可或缺的转移因子，在成骨细胞发育、分化、调控、骨钙化形成及骨修复过程中起着极其重要的作用。<br>　　目的：观察人脱落乳牙干细胞生物学特征，探讨乳牙干细胞骨向分化潜能，以及不同时间点成骨相关转录因子Runx2的动态表达规律。<br>　　方法：体外分离、培养人脱落乳牙干细胞。流式细胞仪检测乳牙干细胞表面标志。体外脂向诱导分化4周后进行油红O染色，检测脂滴形成情况；矿化诱导21 d进行茜素红染色，检测矿化结节形成情况。于成骨诱导的不同时间点，用RT-PCR技术检测Runx2的动态表达。<br>　　结果与结论：通过酶消化法和有限稀释法获得了乳牙干细胞，流式细胞仪检测显示CD146和STRO-1均有不同程度的表达。成脂诱导油红O染色可见橙红色阳性颗粒。矿化诱导茜素红染色呈阳性。RT-PCR技术检测Runx2在成骨诱导第0天已有表达，0-6 d成明显增强趋势，6-12 d显著下降，12-18 d表达再次上升，以后相对平稳。结果表明乳牙干细胞可体外分离、培养，表达间充质干细胞表面标志，具有成脂和成骨向分化能力。Runx2在乳牙干细胞成骨分化各阶段均有表达，早期和晚期表达上升，中期表达有下降趋势。