人脐血间充质干细胞培养方法的比较

Comparison of methods for culturing the mesenchymal stem cells from human umbilical cord blood

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摘要背景：脐血中含丰富的间充质干细胞，可以作为组织工程中一种新的种子细胞来源。目的：应用两种培养基体外培养、扩增、分离纯化脐血间充质干细胞，比较其生物学特性的差异。方法：无菌条件下采取40份足月顺产的脐血，肝素抗凝。应用Ficol 密度梯度离心法分离脐血单核细胞，随机分为两组，其中20份用MesenGro人间充质干细胞培养基进行培养，20份用DMEM培养基进行培养。对比两组梭形的间充质干细胞出现时间、细胞集落出现时间、培养时间、原代细胞数量。选用生长情况良好的原代脐血间充质干细胞，用流式细胞仪检测间充质干细胞表面特异性标记表达情况。结果与结论：MesenGro组梭形的间充质干细胞平均出现时间、细胞集落平均出现时间、原代细胞平均培养时间、原代细胞平均数量为均优于DMEM组(P <0.01)。流式细胞仪检测显示，培养的细胞强表达间充质干细胞表面标志CD73和CD105，阳性率99.1%，不表达造血干细胞表面标志CD45和CD34，阴性率99.3%。结果提示在培养间充质干细胞的数量、形态、生长速度和培养时间诸方面，MesenGro 人间充质干细胞培养基均优于DMEM培养基。选用MesenGro人间充质干细胞培养基可以更纯、更快、更好地从脐血中培养出表达间充质干细胞表面标志的细胞。

作者黄宏宇 ^[1] 刘国平 ^[2] 段莉 ^[3] 陈云芳 ^[3] 熊建义 ^[3] 王大平 ^[3] 学术成果认领

作者单位汕头大学医学院,广东省汕头市,515000 ^[1] 深圳市第二人民医院,广东省深圳市,518035 ^[2] 深圳市第二人民医院，广东省深圳市 518035; 深圳市组织工程实验室，广东省深圳市 518035 ^[3]

关键词干细胞脐带脐血干细胞体外培养脐血间充质干细胞 MesenGro人间充质干细胞培养基 DMEM培养基广东省自然科学基金 fetal blood mesenchymal stem cells culture media cells,cultured

主题词胎血(Fetal Blood)间质干细胞(Mesenchymal Stem Cells)干细胞(Stem Cells)培养基(Culture Media)细胞(Cells)

分类号 R394.2

栏目名称 研究与报告 -- 脐带脐血干细胞

DOI 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.37.010

发布时间 2014-10-31

基金项目

广东省自然科学基金项目(S2012010008129) 深圳市科创委深圳市重点实验室提升项目(ZDSY20120614154551201) 深圳市科创委国际合作项目(GJHZ20130412153906739) 深圳市科创委科技研发资金研发项目(CXZZ20120614160234842) 深圳科创委技术攻关项目