不同共培养模式下间充质干细胞对造血干细胞增殖的作用

Coculture with mesenchymal stem cells facilitates the proliferation of hematopoietic stem cells under different coculture modes

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摘要背景:虽然进行了大量相关研究,但目前仍缺乏切实可行的体外扩增造血干细胞的方法.间充质干细胞能分泌多种促进造血干细胞增殖并抑制其分化的细胞因子,在维持造血微环境及调控造血干细胞功能中发挥着重要的作用.目的:探讨不同共培养模式下骨髓间充质干细胞在体外对造血干细胞增殖的影响.方法:采用全骨髓贴壁法体外培养 C57BL/6小鼠间充质干细胞至 P3代,采用 miniMACS 磁珠分选仪分选GFP小鼠(C57系)骨髓CD117+细胞(造血干细胞),采用不同共培养模式将2种细胞进行共培养:对照组为造血干细胞单独培养组;实验组为 Transwell 共培养组(上室接种造血干细胞、下室接种间充质干细胞);2D 接触共培养组(24孔板共同接种造血干细胞与间充质干细胞).分别于共培养1,3,5,7 d于倒置相差显微镜、荧光显微镜下观察造血干细胞的形态,并检测造血干细胞的活性细胞数.结果与结论:共培养1-7 d,各组造血干细胞数量均随着培养时间的增加而增加(P < 0.05).各组细胞自3 d开始进入对数生长期,5 d时部分造血干细胞开始出现形态变化.比较第7天造血干细胞活性细胞数,可知与间充质干细胞共培养的实验组及2D接触共培养组均明显高于对照组(P < 0.05):而2D接触共培养组造血干细胞数明显高于非接触培养的实验组(P < 0.05).结果提示:间充质干细胞在体外能够有效促进造血干细胞增殖,接触共培养条件下其促进作用更明显.

作者汪姝玥 ^[1] 林凡莉 ^[1] 钱怡 ^[1] 陈小青 ^[1] 刘洋 ^[1] 李书坛 ^[1] 程艳 ^[1] 熊皓 ^[1] 黄纯兰 ^[2] 学术成果认领

作者单位西南医科大学附属医院血液内科,四川省泸州市,646000 ^[1] 西南医科大学附属医院血液内科,四川省泸州市 646000;成都市第三人民医院血液内科,四川省成都市 610031 ^[2]

关键词造血干细胞间充质干细胞共培养接触共培养组 3D共培养 Transwell共培养饲养层

主题词造血干细胞(Hematopoietic Stem Cells)间质干细胞(Mesenchymal Stem Cells)细胞(Cells)骨髓(Bone Marrow)接种(Vaccination)

分类号 R394.2

栏目名称 造血干细胞

DOI 10.3969/j.issn.2095-4344.0508

发布时间 2018-06-15

基金项目

国家自然科学基金资助项目 四川省教育厅重大培育项目(14CZ0017)the National Natural Science Foundation of China,No.81450030 the Major Culture Program of Sichuan Provincial Education Department,No.14CZ0017