单根肌纤维法分离培养多裂肌卫星细胞及鉴定

Isolation and culture of multifidus satellite cells by single muscle fiber method

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摘要背景:多裂肌的损伤、萎缩是临床各种腰背痛及功能障碍的主要来源之一,肌卫星细胞是肌肉干细胞,对肌肉的损伤修复起至关重要的作用.但目前尚缺少有关多裂肌卫星细胞分离培养方面的研究.目的:采用单根肌纤维法分离大鼠多裂肌卫星细胞并进行鉴定.方法:在体分离大鼠多裂肌,采用单根肌纤维法获得多裂肌卫星细胞,经反复差速贴壁法纯化,观察其形态变化并绘制细胞增殖曲线;以分化培养基进行诱导,观察其成肌分化情况;并采用免疫荧光法鉴定多裂肌卫星细胞标志蛋白Pax7、Myod、Desmin的表达.结果与结论:①单根多裂肌纤维经培养72 h后,可见肌纤维周围有大量长梭形或纺锤形细胞贴壁;②采用差速贴壁法纯化后,可见原代细胞呈圆形,高折光性,重新接种后24-48 h可贴壁,其生长呈"S"型;③以分化培养基诱导可出现较大肌管;④免疫荧光鉴定可见Pax7、Myod在肌卫星细胞的细胞核中为阳性反应,Desmin在细胞质中为阳性反应;⑤结果表明,单根肌纤维法可成功分离大鼠多裂肌卫星细胞,可用于未来多裂肌再生修复方面的研究.

作者刘通 ^[1] 于佳妮 ^[2] 陈玉佩 ^[3] 陈欢 ^[4] 邹德辉 ^[3] 晏珺 ^[3] 卢宗孝 ^[3] 刘悦 ^[1] 张莉 ^[3] 霍则军 ^[5] 学术成果认领

作者单位广东省第二中医院针灸康复科,广东省广州市,510095 ^[1] 广东省中医院康复科,广东省广州市,510120 ^[2] 北京中医药大学针灸推拿学院,北京市,100029 ^[3] 江苏省人民医院针灸科,江苏省南京市,210000 ^[4] 北京大学第三医院中医科,北京市,100191 ^[5]

关键词单根肌纤维多裂肌肌卫星细胞分离培养鉴定 Pax7 Myod Desmin 损伤修复国家自然科学基金

主题词肌(Muscles)细胞(Cells)创伤和损伤(Wounds and Injuries)自然科学学科(Natural Science Disciplines)大鼠(Rats)

分类号 R394.2

栏目名称 干细胞培养与分化

DOI 10.3969/j.issn.2095-4344.0941

发布时间 2018-09-13

基金项目

国家自然科学基金青年基金 国家自然科学基金面上项目