胰腺组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛样结构的鉴定

Identification of islet-like structures differentiated from bone marrow mesenchymal stem cells induced by pancreatic tissue lysate

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摘要背景:目前,体外已成功将骨髓间充质干细胞定向诱导分化为能够分泌胰岛素的胰岛样细胞团,但是对细胞的形态变化规律、胰岛样细胞团中内分泌细胞的类型及其相互关系的研究报道较少.目的:观察骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛样结构过程中细胞的形态变化、内分泌细胞的组成及分布规律.方法:取生长良好的第3代骨髓间充质干细胞,扩增培养至细胞集落汇合占据瓶底面积80％,加入胰腺组织裂解液连续诱导培养.以双硫腙染色方法对骨髓间充质干细胞定向分化形成的细胞团进行初步筛选,Mallory染色鉴别胰岛内分泌细胞的类型及其分布;采用免疫荧光细胞化学染色法检测胰岛内分泌细胞中胰岛素、C肽、胰高血糖素和生长抑素蛋白表达.结果与结论:①双硫腙染色显示,随着诱导时间延长,阳性细胞数量逐渐增多;②Mallory染色显示,胰岛样细胞团内α样细胞位于周边,β样细胞分布在中央及周边,成纤维样细胞分布在周围;③免疫荧光染色显示,胰岛样细胞团内有胰岛素、C肽、胰高血糖素和生长抑素阳性细胞;④结果表明,在特定的微环境条件下,骨髓间充质干细胞能分化为胰岛样结构,内含α、β、δ样细胞,周围有类成纤维细胞包绕.

作者刘红静1 ^[1] 王慧丰1 ^[1] 韦雅淑2 ^[2] 赵文婧1 ^[1] 陈维平1 ^[1] 学术成果认领

作者单位广西医科大学组织学与胚胎学教研室,广西壮族自治区南宁市,530021 ^[1] 广西壮族自治区计划生育研究中心,广西壮族自治区南宁市,530021 ^[2]

关键词骨髓间充质干细胞胰腺组织裂解液诱导分化胰岛样结构内分泌细胞广西自然科学基金 Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Cell Differentiation Islets Endocrine Cells Tissue Engineering

主题词胰岛(Islets of Langerhans)骨髓(Bone Marrow)间质干细胞(Mesenchymal Stem Cells)细胞(Cells)胰腺(Pancreas)

分类号 R459.9 R394.2

栏目名称 干细胞培养与分化

发布时间 2019-07-12

基金项目

广西自然科学基金 (2012GXNSFAA05-3126) ，项目负责人:陈维平 广西科技厅资助项目 项目负责人:陈维平 广西科技厅资助项目 ( 桂科攻 0592007-1G) ，项目负责人:陈维平 广西医科大学青年科学基金 (GXMUYSF201528) ，项目负责人:赵文婧 2017 年度广西高校中青年教师基础能力提升项目 (2017KY0096) ，项目负责人:赵文婧 广西再生医学重点实验室开放课题资助项目 ( 桂再重开 201703) ，项目负责人:赵文婧