换一批蛋白芯片筛选用于培养Muse细胞的纤维蛋白原和明胶组合基质
Preparation of protein chips for screening matrix for Muse cell culture based on fibrinogen and gelatin
摘要背景:Muse细胞在再生医学中具有巨大的医疗潜力,但目前其体外培养需要通过细胞簇悬浮的方法,不利于大规模扩增和应用.蛋白质是细胞外基质的重要组成部分之一,不同的蛋白质在细胞生长过程中起着不同的作用,因此可以通过高通量的方法快速筛选有利于Muse细胞在二维表面黏附扩增的蛋白质基质材料.目的:选出合适的蛋白质基材,用于Muse细胞的表面黏附培养和传代.方法:以牛血清白蛋白、牛血纤维蛋白原和明胶为原料,通过喷墨打印进行点样和蛋白质两两物理混合,制备成蛋白微点阵列芯片,利用高通量筛选方法选出适合Muse细胞黏附的最佳蛋白质组合.采用常规方法在蛋白基材表面进行Muse细胞传代培养并进行表征.结果 与结论:①由高通量筛选出两种有利于原代Muse细胞黏附的蛋白组合,两种组合分别为:牛血清白蛋白与明胶、牛血纤维蛋白原与明胶,组合比例均为7/17;②利用CCK8法测试原代Muse细胞在两种组合蛋白包被板的生长状况,各组细胞都呈现正常的增殖情况;经过6 d的培养,在牛血纤维蛋白原与明胶组合包被板上培养的细胞呈现较好的增殖状态;③通过对在蛋白包被板上传代培养的1代及3代Muse细胞的免疫荧光染色结果进行分析,结果显示,由牛血纤维蛋白原和明胶按7/17比例混合制备的基材能支持Muse细胞至少3代的黏附培养与扩增,并且维持较好的干细胞特性.
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