慢病毒下调酪蛋白激酶2相互作用蛋白1表达的骨髓间充质干细胞修复骨质疏松大鼠牙槽骨缺损

Lentiviral down-regulation of casein kinase 2-interacting protein-1 expression in bone marrow mesenchymal stem cells to repair alveolar bone defects in osteoporosis rats

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摘要背景:在口腔牙槽骨修复治疗过程中,患者的全身状况尤其是骨质疏松症等系统性疾病往往会影响治疗效果,近来发现酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(casein kinase 2-interacting protein-1,CKIP-1)具有负调控成骨的作用,因此有希望作为新的靶点用于治疗骨质疏松.目的:探究CKIP-1表达下调的骨髓间充质干细胞对骨质疏松大鼠牙槽骨缺损的修复作用.方法:①从1周龄SD乳鼠股骨及胫骨骨髓中分离培养出骨髓间充质干细胞,慢病毒转染降低骨髓间充质干细胞中的CKIP-1水平;②通过维甲酸[70 mg/(kg?d)]灌胃21 d的方式建立骨质疏松SD大鼠模型,将CKIP-1表达下调的骨髓间充质干细胞与明胶海绵复合体、空载体转染的骨髓间充质干细胞与明胶海绵复合体、明胶海绵分别植入骨质疏松大鼠模型牙槽骨缺损内,正常组将明胶海绵植入正常大鼠牙槽骨缺损内.术后正常喂养30 d后,取上颌牙槽骨进行苏木精-伊红染色并通过Lane-Sandhu组织学评分和新生骨百分比评估骨缺损愈合情况,通过qRTPCR技术和免疫组化染色检测各组术区牙槽骨中CKIP-1、碱性磷酸酶、骨钙素的mRNA相对表达量及阳性表达情况.结果与结论:①与空载体转染相比,CKIP-1下调后的骨髓间充质干细胞中CKIP-1的mRNA相对表达量减少(P<0.05);②与植入空载体转染的骨髓间充质干细胞与明胶海绵复合体组、明胶海绵组相比,植入CKIP-1表达下调的骨髓间充质干细胞与明胶海绵复合体组Lane-Sandhu组织学评分和新生骨百分比显著升高(P<0.05),与正常组相近;碱性磷酸酶、骨钙素表达显著升高(P<0.05);③结果说明,局部移植CKIP-1下调的骨髓间充质干细胞对骨质疏松大鼠牙槽骨缺损具有明显的修复作用.