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镁基合金支架负载兔源性骨髓间充质干细胞构建组织工程化骨复合支架

Construction of tissue-engineered bone composite scaffolds by loading rabbit-derived bone marrow mesenchymal stem cells on magnesium-based alloy scaffolds

摘要背景:随着组织工程学的深入研究与快速发展,组织工程支架为骨组织修复提供了新的契机.目的:探讨骨髓间充质干细胞与镁基合金支架共培养后的细胞增殖情况,为组织工程化骨支架构建提供新思路,进而为组织工程支架临床应用提供依据.方法:无菌条件下抽取兔骨髓液,使用全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行流式细胞学鉴定和成骨分化能力检测.将第3代骨髓间充质干细胞分别接种于镁基合金支架和壳聚糖-聚已内酯-磷酸三钙支架,第3,10天进行激光共聚焦扫描观察细胞生长情况,第1,4,7,10,14天行MTT检测细胞增殖情况.结果与结论:①分离培养的细胞高表达CD44和CD90,几乎不表达CD34;②经成骨诱导后,细胞形态逐渐变为多角形,Von Kossa染色可见细胞之间钙结节染成黑色,碱性磷酸酶活性较未诱导对照组升高(P<0.05);③镁基合金与骨髓间充质干细胞共培养后,共聚焦显微镜扫描显示细胞可在支架上黏附并呈团块状生长,随着时间延长,镁基合金支架较壳聚糖-聚已内酯-磷酸三钙支架上负载的细胞增殖活跃,细胞数量明显增多,MTT检测显示两种材料与骨髓间充质干细胞共培养至10 d时,细胞生长达峰值;④结果表明,兔源性骨髓间充质干细胞具有良好的成骨潜能,与镁基合金支架共培养后,细胞在支架表面生长良好,成功构建了组织工程化镁基种植体.

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