不同培养基对小鼠卵母细胞体外成熟质量及发育潜能的影响

Effects of different culture media on quality and developmental potential of mouse oocytes after in vitro maturation

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摘要背景:近年,未成熟卵母细胞体外成熟技术的需求逐渐增加.卵母细胞成熟受多种因素影响,其中培养基的选择尤为重要,目前尚无统一方案.目的:用不同成熟培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,研究其对卵母细胞质量及发育潜能的影响.方法:用G-1TM PLUS培养基、CZB培养基和M16培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,并以体内成熟卵母细胞为对照组,比较各组间的体外受精和早期胚胎发育能力.对于各组成熟后卵母细胞,采用免疫荧光方法评估线粒体功能,共聚焦显微镜实时成像系统检测钙震荡情况.结果与结论:①3组之间第一极体排出率无明显差异(P>0.05);②G-1TM PLUS组体外受精率(52.86±11.24)%高于M16组(37.76±6.70)%和CZB组(30.62±5.51)%;CZB组的囊胚率(36.23±6.63)%低于对照组(78.16±4.17)%、G-1TM PLUS组(55.75±7.63)%和M16组(53.36±6.33)%;③与对照组相比,仅CZB组的纺锤体长宽比增加;④CZB组线粒体功能差于对照组、G-1TM PLUS组及M16组,并出现CZB组线粒体异常凝集现象;⑤受精后CZB组及M16组的钙震动频率显著高于G1组和对照组.综上所述,在小鼠卵母细胞体外成熟过程中,G-1TM PLUS、CZB及M16培养基的体外成熟率无差异,但G-1TM PLUS培养基有更高的受精率和囊胚形成率.