人参皂苷Rg1抑制H2O2诱导人牙周膜细胞的凋亡及自噬
Ginsenoside Rg1 inhibits H2O2-induced apoptosis and autophagy in human periodontal ligament cells
摘要背景:课题组前期研究发现H2O2和人参皂苷Rg1能引起人牙周膜细胞活性氧水平发生变化,但活性氧和细胞凋亡、自噬的关系尚不清楚.目的:探索人参皂苷Rg1对H2O2诱导人牙周膜细胞凋亡和自噬的作用及机制.方法:将人牙周膜细胞分为对照组、H2O2组和H2O2+Rg1组,其中人参皂苷Rg1(50 μmol/L)预孵育24 h,H2O2处理2 h(500 μmol/L).CCK-8法检测细胞的增殖能力;荧光探针DCFH-DA检测细胞的活性氧水平;qRT-PCR、Western blot法检测血红素加氧酶1、凋亡相关因子Caspase-3、Bax、抗凋亡因子Bcl-2、自噬相关因子Beclin-1、P62、LC3、通路相关因子PI3K、AKT、mTOR mRNA及蛋白表达.结果与结论:①与对照组比较,H2O2组人牙周膜细胞的增殖活力下降;与H2O2组比较,H2O2+Rg1组人牙周膜细胞的增殖活力升高;②与对照组比较,H2O2组人牙周膜细胞内活性氧和血红素加氧酶1表达增加;与H2O2组比较,H2O2+Rg1组人牙周膜细胞内活性氧和血红素加氧酶1表达降低;③与对照组比较,H2O2组人牙周膜细胞内Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3表达升高,Bcl-2、P62表达降低;与H2O2组比较,H2O2+Rg1组人牙周膜细胞内Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3表达降低,Bcl-2、P62表达升高;④与对照组比较,H2O2组人牙周膜细胞内PI3K、AKT、mTOR表达降低;与H2O2组比较,H2O2+Rg1组人牙周膜细胞内PI3K、AKT、mTOR表达升高;⑤结果提示:人参皂苷Rg1能够通过清除细胞内过量活性氧,上调PI3K/AKT/mTOR通路相关因子的表达,从而抑制H2O2诱导的人牙周膜细胞凋亡和自噬.
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