摘要背景:体外淋巴细胞增殖实验常用于检测医疗器械潜在的免疫原性,但在相关标准中均未给出详尽的浸提条件及作用剂量.目的:考察供试品不同浸提条件及作用剂量对体外人淋巴细胞增殖的影响,思考在选择体外淋巴细胞增殖实验条件时需考虑的因素.方法:实验检测同种骨修复材料与肝素修饰人工晶状体两种供试品,均分为以下12组:①实验组1:供试品24 h完全培养基(含体积分数10%胎牛血清的RPMI改良培养基)浸提液200 μL+淋巴细胞悬液50 μL;②阴性对照组1:24 h完全培养基200 μL+淋巴细胞悬液50 μL;③实验组2:供试品24 h完全培养基浸提液100 μL+淋巴细胞悬液100 μL;④阴性对照组2:24 h完全培养基100 μL+淋巴细胞悬液100 μL;⑤实验组3:供试品72 h RPMI改良培养基浸提液(实验前加体积分数10%胎牛血清)200 μL+淋巴细胞悬液50 μL;⑥阴性对照组3:72 h RPMI改良培养基(实验前加体积分数10%胎牛血清)200 μL+淋巴细胞悬液50 μL;⑦实验组4:供试品72 h RPMI改良培养基浸提液(实验前加体积分数10%胎牛血清)100 μL+淋巴细胞悬液100 μL;⑧阴性对照组4:72 h RPMI改良培养基(实验前加体积分数10%胎牛血清)100 μL+淋巴细胞悬液100 μL;⑨阳性对照组1:含10 μg/mL植物血凝素M的完全培养基200 μL+淋巴细胞悬液50 μL;⑩阳性对照组2:含10 μg/mL植物血凝素M的完全培养基100 μL+淋巴细胞悬液100 μL;?空白对照组1:250 μL完全培养基;?空白对照组2:200 μL完全培养基.培养3 d后,采用CCK-8法检测淋巴细胞增殖.结果与结论:①不同实验条件下,同种骨修复材料浸提液均可增强人淋巴细胞的活性,以RPMI改良培养基浸提72 h、浸提液与淋巴细胞悬液的体积比为4∶1的实验条件最为显著;肝素修饰人工晶状体在该条件下对淋巴细胞活性有明显的抑制作用,可能与浸提液中的肝素有关,但在完全培养基浸提24 h、浸提液与淋巴细胞悬液的体积比为4∶1的实验条件下对淋巴细胞活性有轻微的增强作用;②供试品不同浸提条件及作用剂量下,人体外淋巴细胞增殖实验结果可能会有较大差异,实验条件的选择需结合产品临床应用情况,也需考虑产品的固有特性.