Circ0005512促进雌性大鼠脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡

Circ0005512 promotes microglia/macrophage pyroptosis after spinal cord injury in female rats

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摘要背景:神经炎症是导致继发性脊髓损伤的重要因素,小胶质细胞/巨噬细胞焦亡是介导脊髓损伤后神经炎症的重要部分,研究显示脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞发生焦亡,但circRNA对脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡的调控机制尚不清楚.目的:探讨circ0005512在脊髓损伤后调节小胶质细胞/巨噬细胞焦亡中的作用和机制.方法:将雌性Wistar大鼠随机分为假手术组和脊髓损伤组,BBB评分评估运动功能,苏木精-伊红染色检测脊髓空洞面积,二代测序筛选脊髓组织中差异表达的circRNA,Real-time PCR验证circ0005512的表达.免疫荧光、Western blot、ELISA、Real-time PCR检测脊髓损伤大鼠的细胞焦亡情况以及脂多糖诱导的小胶质细胞系HAPI细胞的焦亡情况,基因敲降验证circRNA0005512对小胶质细胞焦亡的调控作用.结果与结论:①脊髓损伤7 d后,脊髓损伤部位出现明显空洞,脊髓损伤后即刻大鼠运动功能完全缺失,随着时间的推移,脊髓损伤组大鼠运动功能逐渐部分恢复,BBB评分与假手术组比较有显著差异;②二代测序筛选到circ0005512明显上调,且在动物模型和细胞模型中均得到了验证;③免疫荧光、Western blot、Real-time PCR、ELISA实验证实脊髓损伤组织和脂多糖诱导的HAPI细胞中焦亡标志物(NLRP3、GSDMD、caspase-1)均明显上调;④在脂多糖诱导HAPI细胞中敲降circ0005512后,细胞焦亡标志物NLRP3明显下调;⑤以上结果表明circ0005512促进大鼠脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡.