摘要背景:黑枸杞花青素(Anthocyanins in Lycium ruthenicum Murr,ALRM)是黑枸杞中重要的活性成分之一,具有抗氧化、免疫调节等功效.人脂肪源性血管外膜细胞(CD146+hAD-PCs)是骨髓间充质干细胞的前体细胞,在体外具有促进造血干/祖细胞增殖与分化的功能.ALRM联合CD146+hAD-PCs对脐血造血干/组细胞的体外支持作用有待于研究.目的:探讨ALRM联合CD146+hAD-PCs对脐血CD34+造血干/祖细胞体外扩增的支持作用.方法:CCK-8法检测不同质量浓度ALRM(0,200,400,600,800,1 000 mg/L)对CD146+hAD-PCs增殖的影响;流式细胞术检测ALRM对CD146+hAD-PCs细胞周期的影响.共培养实验分为空白组、ALRM组、CD146+hAD-PCs组、ALRM+CD146+hAD-PCs组,分析ALRM联合CD146+hAD-PCs对脐血CD34+造血干/祖细胞的体外支持作用.共培养1,2,4周,比较扩增后细胞数量、集落形成单位数量,流式细胞仪检测细胞免疫表型,ELISA检测细胞因子水平.结果与结论:①ALRM质量浓度为200 mg/L时,CD146+hAD-PCs活力最高,CD146+hAD-PCs的G0/G1期细胞比例下降,S期、G2/M期细胞比例上升(P<0.01).②脐血CD34+造血干/祖细胞数量变化:在共培养1,2,4周时ALRM+CD146+hAD-PCs组高于ALRM组(P均<0.05),在共培养2,4周时ALRM+CD146+hAD-PCs组高于CD146+hAD-PCs组(P均<0.05),ALRM组与空白组随着共培养时间延长细胞数量逐渐减少.③集落形成能力及免疫表型分析:在共培养1,2周时ALRM+CD146+hAD-PCs组的集落形成单位数量高于CD146+hAD-PCs组和ALRM组(P均<0.05);在共培养1,2,4周时ALRM+CD146+hAD-PCs组CD45+、CD34+CD33-细胞比例高于CD146+hAD-PCs组(P均<0.01).④细胞因子变化:在共培养4周时ALRM+CD146+hAD-PCs组的白细胞介素2水平高于ALRM组、CD146+hAD-PCs组(P<0.05);在共培养2,4周时ALRM+CD146+hAD-PCs组白细胞介素3水平高于CD146+hAD-PCs组(P<0.05);在共培养1周时ALRM+CD146+hAD-PCs组的粒细胞集落刺激因子水平高于CD146+hAD-PCs组,在共培养2周时高于ALRM组、CD146+hAD-PCs组(P<0.01);在共培养1,2,4周时ALRM组、ALRM+CD146+hAD-PCs组的干扰素γ水平低于CD146+hAD-PCs组(P<0.05).⑤由于空白组无基质细胞,脐血CD34+造血干/祖细胞在共培养1周之后就无法计数,未进行免疫表型、集落分析和细胞因子检测.⑥结果表明:ALRM可以通过促进CD146+hAD-PCs增殖和细胞周期转化进而促进脐血CD34+造血干/祖细胞的体外扩增,在造血干细胞移植研究方面具有重要价值.