摘要背景:熊果酸可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化,但其对人牙周膜干细胞是否具有促成骨作用目前相关报道少见.目的:探讨熊果酸对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化能力的影响.方法:分离、培养人牙周膜干细胞,取第3代细胞,分别采用含不同浓度(0,1,2,4,6,8 μmol/L)熊果酸的普通培养基干预,干预1,3,5,7 d后,采用CCK-8法检测细胞增殖,筛选适宜干预浓度.取第3代人牙周膜干细胞,分别用含0,1,2,4 μmol/L熊果酸的成骨诱导液干预,干预7 d后,采用qRT-PCR法检测碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素mRNA的表达,干预14 d后,茜素红染色观察矿化结节形成.取第3代人牙周膜干细胞,对照组加入成骨诱导液,熊果酸组、拮抗剂组分别加入含熊果酸(2 μmol/L)、骨形态发生蛋白信号通路拮抗剂Noggin的成骨诱导液,熊果酸+拮抗剂组加入含熊果酸(2 μmol/L)、骨形态发生蛋白信号通路抑制剂Noggin的成骨诱导液,培养7 d后,采用qRT-PCR和Western blot检测骨形态发生蛋白2、Smad1、骨桥蛋白、Runx2的mRNA及蛋白表达.结果与结论:①1,2,4 μmol/L熊果酸可促进人牙周膜干细胞的增殖,6,8 μmol/L熊果酸可抑制人牙周膜干细胞的增殖,后续实验选择1,2,4 μmol/L熊果酸进行干预;②与0 μmol/L相比,1,2,4 μmol/L熊果酸可促进碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素mRNA的表达以及矿化结节的形成(P<0.05),其中以2 μmol/L熊果酸效果最显著;③与对照组比较,熊果酸组骨形态发生蛋白2、Smad1、骨桥蛋白、Runx2的mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05),拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05);与熊果酸组比较,熊果酸+拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05);④结果表明,熊果酸可通过激活骨形态发生蛋白信号通路促进人牙周膜干细胞的成骨分化.