硝基油酸对大鼠下颌下腺上皮细胞放射损伤的保护机制
Protective mechanism of nitrooleic acid on submandibular gland cell radiation injury in rats
摘要背景:研究发现Nrf2/ARE信号通路潜在激活剂硝基油酸具有低毒可控的特征,对放射性组织损伤具有保护作用.目的:探讨硝基油酸能否通过调节Nrf2/ARE信号通路对下颌下腺上皮细胞放射损伤发挥保护作用.方法:体外培养SD大鼠下颌下腺上皮细胞,CCK-8筛选硝基油酸最佳给药浓度与时间,然后将下颌下腺上皮细胞分为未放射组、放射对照组、硝基油酸组、硝基油酸+ML385(Nrf2/ARE信号通路特异性抑制剂)组以及ML385组,按实验分组用硝基油酸和ML385对下颌下腺上皮细胞进行相应预处理24 h,再给予5 Gy射线放射造模.放射后48 h,CCK-8检测细胞增殖率,实时定量PCR检测细胞内Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达,实时定量PCR及酶联免疫吸附法检测细胞分泌功能及炎症因子表达,DCFH-DA荧光探针试剂盒检测细胞内活性氧水平.结果与结论:①与放射对照组比较,硝基油酸组大鼠下颌下腺上皮细胞增殖率与分泌功能相关因子水通道蛋白5、α-淀粉酶表达水平升高(P<0.05),Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达升高(P<0.05),炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平下降(P<0.05),活性氧生成减少(P<0.01);②与硝基油酸组比较,硝基油酸+ML385组的细胞增殖率与分泌功能相关因子水通道蛋白5、α-淀粉酶表达水平下降(P<0.05),Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达下降(P<0.05),炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平升高(P<0.05),活性氧生成增多(P<0.05).结果表明,硝基油酸能够减轻放射所致的大鼠下颌下腺上皮细胞损伤,提高细胞增殖能力和分泌功能,降低细胞内炎性因子表达和活性氧水平,其发挥保护作用可能与激活Nrf2/ARE信号通路存在关联.
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