摘要背景:天然生物材料(如同种异体材料)生产过程中极易受到细菌污染,其中革兰阴性菌释放出的细菌内毒素可以引起人体发热、凝血、休克,严重的会导致死亡.如何去除同种异体材料中的内毒素,同时又能保证材料的天然结构和生物活性,目前尚未有相关报道.目的:探究去除同种异体材料等天然生物材料中内毒素的方法及效果,并对H2O2残留进行控制.方法:采用H2O2溶液协同超声处理方法去除同种异体骨材料的内毒素,研究超声条件及H2O2浓度对内毒素去除效果的影响程度,其中H2O2浓度分别设定为1%,2%,3%,4%,5%,超声功率分别设定为80,120,140,160,200 W,超声时间分别设定为20,30,40,50,60 min,超声水浴温度分别设定为30,35,40,45,50 ℃,通过内毒素含量检测选择最优的组合条件处理同种异体骨材料,进行后续实验.对去除内毒素后同种异体骨材料的微观结构、H2O2残留及细胞毒性进行检测,同时探讨不同浓度H2O2残留对L929小鼠成纤维细胞存活率的影响.结果与结论:①从内毒素去除效果来看,实验条件为H2O2浓度4%、超声功率200 W、超声时间50 min、超声水浴温度50 ℃时,为去除同种异体骨材料中内毒素的最佳条件,选择该最优组合去除同种异体骨材料的内毒素;②去除内毒素处理后同种异体骨材料在60 ℃水浴、换6次液后H2O2残留量小于47.551 mg/kg,对L929小鼠成纤维细胞活性无影响;③光学显微镜及扫描电镜观察显示,采用H2O2溶液协同超声处理对同种异体骨材料的结构无影响;④结果表明,H2O2溶液协同超声处理方式具有高效快速去除内毒素的特点,可保证同种异体骨材料的安全性.
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