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转录因子NKX2.1促进诱导多能干细胞向肺干细胞的分化

Transcription factor NKX2.1 promotes differentiation of induced pluripotent stem cells into lung stem cells

摘要背景:如何促进诱导多能干细胞向肺干细胞分化对肺损伤修复具有重要意义.NKX2.1是肺上皮分化过程中最早的标志物,在肺发育过程中发挥重要调控作用,然而其表达对诱导多能干细胞向肺干细胞分化的影响还知之甚少.目的:探究NKX2.1对诱导多能干细胞向肺干细胞方向分化的影响.方法:体外培养人诱导多能干细胞,采用实时荧光定量PCR和免疫荧光检测多能干细胞特异基因的表达;通过瞬时转染向人诱导多能干细胞中过表达NKX2.1,再诱导其向肺干细胞方向分化,诱导分化7 d采用实时荧光定量PCR、免疫荧光检测FoxA2、SOX9和P63的表达,诱导分化13 d采用免疫荧光检测肺泡细胞标记分子SPB和SPC的表达.结果与结论:①诱导多能干细胞紧密集结呈典型克隆样生长,显著高表达干细胞特异表达基因OCT-4、SOX2和NANOG;②与未转染对照组相比,过表达NKX2.1组人诱导多能干细胞中NKX2.1表达显著升高(P<0.000 1);③诱导分化7 d,与未转染对照组相比,过表达NKX2.1组肺干细胞相关标记物FoxA2、SOX9和P63的表达显著升高(P<0.000 1);④诱导分化13 d,与未转染对照组相比,过表达NKX2.1组肺泡细胞标记分子SPB和SPC荧光强度显著增加.结果表明NKX2.1可以促进诱导多能干细胞向肺干细胞方向分化.

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