摘要背景:由肿瘤及创伤所致的骨组织缺失会对术后康复产生不良影响,因此在治疗过程中通常需要植入支架材料,然而现有的植入材料相对单一、缺乏抗菌性,早期植入后有可能导致医源性自体感染,对成骨产生不良影响.目的:构建KR-12-a5多肽-纳米羟基磷灰石-小肠黏膜下层复合支架,评估该复合支架作为促进骨缺损修复材料的可行性.方法:通过1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺交联法制备小肠黏膜下层支架与含25,50,100 mg/mL纳米羟基磷灰石的小肠黏膜下层支架(记为nHA-SIS支架),通过力学性能测试筛选出适宜的支架用于后续实验.检测KR-12-a5多肽溶液对金黄色葡萄球菌、格登链球菌、具核梭杆菌的抗菌性能.将nHA-SIS支架分别浸泡于250,500,1 000 μg/mL KR-12-a5多肽溶液中24 h,冻干制得负载多肽的纳米羟基磷灰石-猪小肠黏膜下层复合支架(记为P-nHA-SIS支架),表征3组支架的缓释性能.将nHA-SIS支架与3组P-nHA-SIS支架分别与金黄色葡萄球菌、格登链球菌、具核梭杆菌共培养24 h或48 h,通过活死细菌染色与扫描电镜筛选抗菌能力较强的支架用于后续实验.表征未交联小肠黏膜下层支架、交联小肠黏膜下层支架、nHA-SIS支架与P-nHA-SIS支架的降解性能与吸水率.将交联小肠黏膜下层支架、nHA-SIS支架、P-nHA-SIS支架浸提液分别与MC3T3-E1细胞共培养,进行CCK-8实验与活死细胞染色实验;通过Transwell小室实验检测上述3种支架浸提液对MC3T3-E1细胞迁移的影响.结果与结论:①25,50,100 mg/mL nHA-SIS支架的弹性模量与压缩强度均高于小肠黏膜下层支架(P＜0.05),其中25 mg/mL nHA-SIS支架的弹性模量与压缩强度最高,后续实验选择该组支架负载多肽.②KR-12-a5多肽对骨缺损常见菌群(金黄色葡萄球菌、格登链球菌、具核梭杆菌)均具有较强的抗菌活性.3组P-nHA-SIS支架均具有缓释性能.随着多肽质量浓度的增加,P-nHA-SIS支架的抗菌性能增强,其中负载500 μg/mL多肽的P-nHA-SIS支架已达到较满意的抑菌效果,后续选择该组支架.③3组交联支架的降解速率均低于未交联支架,吸水率均大于未交联支架.P-nHA-SIS支架可促进MC3T3-E1细胞的增殖与迁移,并且不影响MC3T3-E1细胞活性.④结果表明,P-nHA-SIS支架具有较强的抗菌性能与促MC3T3-E1细胞增殖、迁移能力,有望应用于骨缺损修复中.