彝药斯赤列二氯甲烷提取物干预骨关节炎模型大鼠的作用及机制
Effect and mechanism of dichloromethane extract of fresh Sambucus adnata Wall.in rat osteoarthritis models
摘要背景:课题组前期研究结果显示彝药斯赤列鲜品甲醇及二氯甲烷提取物具有抗炎、抗氧化、抗血管新生等作用,抗骨关节炎活性明显.目的:探究彝药斯赤列(鲜品)二氯甲烷提取物(fSAW-DCE)对骨关节炎的保护作用及机制.方法:①前交叉韧带切断法复制大鼠骨关节炎模型,术后连续灌胃斯赤列二氯甲烷提取物干预6周,ELISA检测关节腔液中肿瘤坏死因子α水平,苏木精-伊红染色观察关节软骨病理变化,计算关节软骨矿化程度,Micro CT影像学检查骨赘增生及软骨下骨骨量变化.②以小鼠胚胎瘤细胞ATDC5为研究对象,用胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠和维生素C将其诱导分化为软骨细胞,用白细胞介素1β刺激复制软骨细胞炎症模型,然后给予斯赤列二氯甲烷提取物干预,ELISA试剂盒检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α水平,RT-qPCR检测蛋白聚糖及Ⅱ型胶原mRNA表达.③转录组测序方法检测斯赤列二氯甲烷提取物干预软骨细胞炎症模型后的差异基因,探究作用机制.结果与结论:①斯赤列二氯甲烷提取物可抑制关节炎症,降低关节腔液中肿瘤坏死因子α水平(P<0.05),延缓关节软骨矿质化(P<0.05),减轻关节软骨损伤,维持软骨下骨骨量(P<0.05);②斯赤列二氯甲烷提取物可减轻白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症(P<0.05),维持软骨细胞外基质中Ⅱ型胶原mRNA表达水平(P<0.05);③转录组学测序及验证结果显示斯赤列二氯甲烷提取物抗骨关节炎的作用与抑制肿瘤坏死因子/核因子κB信号通路的激活有关.
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