摘要背景:乳腺增生是一种常见的良性乳腺疾病,主要由内分泌失调引起,表现为乳腺组织的异常增生.近年来,中药复方和益生菌在调节内分泌及改善肠道微生态等方面显示出良好的潜力,为乳腺增生的治疗提供了新的思路.目的:观察中药复方及益生菌复方发酵对小鼠乳腺增生的作用及机制,为乳腺增生的临床治疗与预防提供新的理论及实验依据.方法:①运用网络药理学工具预测甜地丁(地锦草)的抗乳腺增生活性及其潜在作用靶点和信号通路.数据库包括:TCMSP、OMIM、GeneCards 数据库、UniProt 网站、Venny 2.1.0 网站、Metascape、HERB网站和STRING 数据库.网络药理学可以通过网络分析、计算机系统分析预测筛选得到中药活性成分对应的靶点、疾病靶点和作用通路等关键信息,因此逐渐广泛用于中药的研究.②实验通过给小鼠注射雌激素和孕激素诱导建立乳腺增生模型,设立正常对照组小鼠每天腹腔注射生理盐水,模型组、给药组小鼠每天腹腔注射0.5 mg/kg苯甲酸雌二醇注射液,持续注射25 d.第26天起,停止注射苯甲酸雌二醇,正常对照组小鼠每天继续肌肉注射生理盐水,模型组和给药组小鼠肌肉注射5 mg/kg 的黄体酮注射液,持续注射 5 d.造模结束后各组分别进行给药,正常组和模型组灌胃0.2 mL/d生理盐水;阳性对照组(消症丸组)按 0.9 mg/g灌胃消症丸水溶液;复方甜地丁低、中、高剂量组按照0.75,1.5,3.0 mg/(g·d)灌胃复方甜地丁水溶液,中药菌发酵低、中、高剂量组按照 0.75,1.5,3.0 mg/(g·d)灌胃复方药水溶液,连续给药30 d.结果与结论:①网络药理学研究结果表明,甜地丁复方(地锦草)含有46种活性成分,与1 213个潜在靶点相关.与已知的588个乳腺增生靶点比对后,推测其中50个靶点可能与该复方对乳腺增生的直接作用有关.②药物干预后,甜地丁高剂量组与未治疗组相比无明显变化,其他干预组肝脏指数均有所降低(P<0.05).③在肾脏和子宫指数方面,甜地丁中剂量组与对照组相比显著降低(P<0.05);在子宫指数方面,模型组与对照组相比显著升高(P<0.01).④经过1个月的药物治疗,消症丸组、甜地丁低、中、高剂量组和中药菌发酵低、中、高剂量组乳腺组织中的小叶和腺泡数量减少,导管开口缩小.随着药物剂量增加,乳腺组织弥漫性增生情况明显改善.⑤ELISA结果显示,与模型组相比,中药菌发酵中剂量组干预后雌激素E2水平较低(P<0.05).此外,甜地丁低剂量组的卵泡刺激素水平低于模型组(P<0.05).⑥对小鼠模型的干预导致所有组的短链脂肪酸和肠道菌群丰度发生变化.⑦上述结果证实,复方甜地丁及其益生菌发酵产物通过调节激素水平、改善肠道菌群结构和增加短链脂肪酸含量,显著改善了小鼠乳腺增生.