摘要背景:中药复方丹灯通脑软胶囊具有多成分协同作用的特点,但传统研究方法难以系统揭示其复杂的作用机制.文章创新性整合高效液相色谱指纹图谱与网络药理学方法,既能实现对中药物质基础的全面评价,还能进一步阐明中药的作用靶点,明确作用途径和机制,为了解中药复方"多成分-多靶点-多通路"作用机制提供新的研究范式.目的:基于高效液相色谱指纹图谱和网络药理学探讨丹灯通脑软胶囊抗缺血性脑卒中的药效物质基础和作用机制.方法:采用高效液相色谱法测定10批丹灯通脑软胶囊指纹图谱,运用LCMS-IT-TOF技术对丹灯通脑软胶囊指纹图谱共有峰进行鉴定;通过SwissTargetPrediction数据库(瑞士生物信息学研究所开发;功能:基于化合物结构预测其潜在作用靶点)预测丹灯通脑软胶囊共有峰成分靶点;通过OMIM数据库(美国约翰霍普金斯大学维护;功能:收录人类遗传疾病及致病基因)、GeneCards数据库(以色列魏茨曼科学研究所开发;功能:整合基因功能、疾病关联及通路信息)收集缺血性脑卒中相关靶点;运用Venny 2.1.0在线工具绘制韦恩图筛选药物与疾病的交集靶点,并运用Cytoscape 3.10.1软件构建"药物-化合物-靶点"互作网络,筛选丹灯通脑软胶囊抗缺血性脑卒中的潜在成分;通过STRING数据库(欧洲分子生物学实验室等机构联合开发,功能:分析蛋白质相互作用网络及核心靶点)进行蛋白相互作用网络分析,得到核心靶点;采用DAVID数据库(美国国家过敏和传染病研究所开发,功能:GO和KEGG通路富集分析)解析丹灯通脑软胶囊抗缺血性脑卒中的核心靶点生物学功能及通路,最终构建"药物-成分-靶点-通路-疾病"多维网络.结果与结论:①建立了丹灯通脑软胶囊成分指纹图谱共有模式,标定了24个共有峰,各峰分离度良好,样品间相似度均>0.9;鉴定出丹灯通脑软胶囊中24个指纹图谱共有峰;获得丹灯通脑软胶囊成分和疾病的交集靶点508个;②蛋白相互作用网络分析、GO功能富集和KEGG通路富集分析发现,丹灯通脑软胶囊可能通过葛根素、丹参酮Ⅰ、阿魏酸乙酯、丹参酮ⅡA、丹参醛等活性成分作用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、肿瘤坏死因子、肿瘤蛋白p53、白蛋白和非受体酪氨酸激酶等核心靶点,通过调节低氧诱导因子1信号通路、高级糖基化终末产物-受体信号通路、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路等多条通路发挥抗缺血性脑卒中的作用.通过化学分析与生物信息学预测的有机融合,系统阐释了丹灯通脑软胶囊的多维作用机制,不仅为其临床疗效提供了物质基础的科学依据,更为重要的是,所建立的"指纹图谱-网络药理学"整合研究框架,为中药物质基础的全面评价及作用机制解析提供了可推广的方法学参考,对推进中药现代化研究具有重要的理论和实践价值.