分泌型模块化钙结合蛋白调控发育性髋关节发育不良大鼠髋臼软骨细胞自噬
Secreted modular calcium binding protein regulates autophagy in the acetabular cartilage of rats with developmental dysplasia of the hip
摘要背景:发育性髋关节发育不良是儿童最常见的骨骼畸形,是青年期骨关节炎的重要危险因素,严重者需行髋关节置换,严重影响患者的生活质量.目的:探讨SMOC2在发育性髋关节发育不良模型大鼠髋臼顶壁软骨中的表达及其对软骨细胞自噬的影响.方法:①将新生SD大鼠随机分成疾病组和对照组(正常大鼠),疾病组大鼠建立发育性髋关节发育不良模型,2周龄时采用RT-qPCR和Western Blot检测髋臼顶壁软骨组织SMOC2的表达,并检测自噬相关蛋白的表达.②提取大鼠髋臼组织软骨细胞,将细胞分为Sh-NC、Sh-SMOC2-1、Sh-SMOC2-2三组,使用Western Blot检测自噬相关蛋白的表达;使用透视电镜观察细胞自噬小体数量.③提取大鼠髋臼组织软骨细胞,将细胞分为Sh-NC、Sh-SMOC2、Sh-SMOC2+740 Y-P(PI3K激活剂)3组,使用Western Blot检测自噬相关蛋白的表达,探究SMOC2是否通过PI3K/AKT通路调控软骨细胞自噬相关蛋白.结果与结论:①与对照组相比,疾病组大鼠髋臼顶壁软骨组织中SMOC2表达下降,自噬相关蛋白P62表达下降,Beclin表达升高,微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ表达无差异.②与Sh-NC组相比,Sh-SMOC2-1、Sh-SMOC2-2组软骨细胞中在细胞中P62表达下降,微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ比值升高,Beclin1表达下降.③与Sh-SMOC2组相比,Sh-SMOC2+740 Y-P组软骨细胞中P62表达升高,微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ/Ⅰ比值下降,Beclin1表达无差异.综上所述,2周龄发育性髋关节发育不良大鼠髋臼软骨细胞自噬增强,SMOC2可以通过PI3K/AKT信号通路调控大鼠软骨细胞的自噬.
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