摘要背景:前期研究证实,持续高糖环境引发的"代谢记忆"效应可通过调控组蛋白乙酰化酶活性显著加剧小鼠海马神经元细胞HT-22的损伤.目的:探讨血糖波动、持续高糖对小鼠海马神经元细胞HT-22凋亡以及组蛋白去乙酰化酶4、沉默信息调节因子1表达的影响.方法:第6代HT-22细胞贴壁后分3组培养:对照组加入25 mmol/L葡萄糖,培养3 d或5 d;高糖组加入55 mmol/L葡萄糖,培养3 d或5 d;血糖波动组加入25 mmol/L葡萄糖培养12 h后更换为55 mmol/L葡萄糖培养12 h,持续波动3 d或5 d.培养3 d,光学显微镜下观察细胞形态;培养5d,流式细胞术检测细胞凋亡;培养3,4,5d后,CCK-8法检测细胞存活率;培养3,5 d后,2,7-二氯荧光素二乙酸酯荧光探针检测细胞中活性氧水平,ELISA法检测细胞上清中组蛋白去乙酰化酶含量,Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、沉默信息调节因子1和组蛋白去乙酰化酶4蛋白表达,RT-qPCR检测细胞中Bax、Bcl-2、Caspase-3、沉默信息调节因子1和组蛋白去乙酰化酶4mRNA表达.结果与结论:①光学显微镜下可见对照组细胞生长状态良好,交织成致密网状,突触间相互连接;高糖组、血糖波动组细胞生长受抑制,细胞间突触连接减少;高糖组细胞凋亡率高于对照组、血糖波动组(P＜0.05),血糖波动组细胞凋亡率高于对照组(P＜0.05).②培养3,4,5d,高糖组细胞存活率低于对照组、血糖波动组(P＜0.05),血糖波动组细胞存活率低于对照组(P＜0.05).③培养3,5d后,高糖组细胞中活性氧水平高于对照组、血糖波动组(P＜0.05),血糖波动组细胞中活性氧水平高于对照组(P＜0.05),高糖组、血糖波动组细胞上清中组蛋白去乙酰化酶含量高于对照组(P＜0.05).④培养3,5d后,高糖组、血糖波动组细胞中组蛋白去乙酰化酶4、Bax、Caspase-3的蛋白与mRNA表达均高于对照组(P＜0.05),沉默信息调节因子1、Bcl-2的蛋白与mRNA表达均低于对照组(P＜0.05),Cleaved Caspase-3蛋白表达高于对照组(P＜0.05).⑤结果表明,血糖波动可能通过上调组蛋白去乙酰化酶4表达、下调沉默信息调节因子1表达诱导HT-22细胞凋亡.