LncRNA UBE2SP2-201对前列腺癌LNCaP细胞恶性生物学行为的调控机制研究
Study on the regulatory mechanism of lncRNA UBE2SP2-201 on the malignant biological behavior of prostate cancer LNCaP cells
摘要目的 分析长链非编码RNA(lncRNA)UBE2SP2-201在前列腺癌组织和细胞中的表达,探讨敲低UBE2SP2-201对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响及机制.方法 使用基因表达分析交互式平台(GEPIA)数据库分析前列腺癌组织中UBE2SP2-201的表达以及UBE2SP2-201的表达与前列腺癌患者生存期的关联情况.qPCR法检测前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞(PC-3、DU-145、LNCaP、22Rv1、C4-2B)中 UBE2SP2-201的表达.将LNCaP细胞随机分为sh-UBE2SP2-201组和sh-NC组,分别转染sh-UBE2SP2-201质粒和sh-NC质粒.克隆形成实验和划痕愈合实验检测敲低UBE2SP2-201对LNCaP细胞增殖和迁移的影响.Western blotting检测敲低UBE2SP2-201对LNCaP细胞增殖蛋白(CDK2、cyclin E)和迁移蛋白(N-cadherin、GRHL2)表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证UBE2SP2-201和miR-455-3p的靶向结合.用GEPIA数据库分析前列腺癌组织中UBE2SP2-201与miR-455-3p表达的相关性.qPCR检测敲低UBE2SP2-201对LNCaP细胞中miR-455-3p表达的影响.结果 UBE2SP2-201在前列腺癌组织中表达明显高于正常前列腺组织(P<0.01).UBE2SP2-201表达较低的前列腺癌患者生存期高于UBE2SP2-201表达较高的患者(P<0.01).UBE2SP2-201在前列腺癌PC-3、DU-145、LNCaP、22Rv1、C4-2B细胞中表达明显高于RWPE-1细胞(均P<0.01),LNCaP细胞中UBE2SP2-201表达最高(P<0.01).敲低UBE2SP2-201可抑制LNCaP细胞的体外增殖和迁移(均P<0.01).敲低UBE2SP2-201后,LNCaP细胞中CDK2、cyclin E、N-cadherin、GRHL2蛋白表达均降低(均P<0.01).UBE2SP2-201能够靶向结合miR-455-3p(P<0.01).前列腺癌组织中UBE2SP2-201与miR-455-3p表达呈负相关(P<0.01).敲低UBE2SP2-201可显著促进LNCaP细胞中miR-455-3p表达(P<0.01).结论 UBE2SP2-201在前列腺癌组织和细胞中高表达,UBE2SP2-201表达可能与前列腺癌患者生存期有关,敲低UBE2SP2-201可显著降低前列腺癌LNCaP细胞的体外增殖和迁移能力,其机制可能与靶向调控miR-455-3p表达有关.
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