LncRNA FGD5-AS1调节miR-129-5p/CDK6轴对膀胱癌细胞恶性生物行为的影响
Impact of lncRNA FGD5-AS1 on the malignant biological behavior of bladder cancer cells by regulating miR-129-5p/CDK6 axis
摘要目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1调节微小RNA(miR)-129-5p/周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)轴对膀胱癌(BC)细胞恶性生物行为的影响.方法 选取105例经确诊为BC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本,培养人BC细胞株T24,采用RT-qPCR法测定组织和T24细胞中FGD5-AS1、miR-129-5p和CDK6 mRNA的表达.将T24细胞随机分为对照组(Control组)、si-NC 组、si-FGD5-AS1 组、si-FGD5-AS1+inhibitor NC 组、si-FGD5-AS1+miR-129-5p inhibitor 组.CCK-8 法检测 T24 细胞活力、Wound healing实验测定T24细胞迁移、Transwell实验测定T24细胞侵袭、流式细胞术测定T24细胞凋亡、Western blot检测Bax、Bcl-2、Caspase3和CDK6蛋白的表达.双荧光素酶报告基因实验分别验证FGD5-AS1和miR-129-5p、miR-129-5p和CDK6的关系.结果 BC肿瘤组织中FGD5-AS1、CDK6 mRNA高表达,miR-129-5p低表达(P<0.05).沉默FGD5-AS1后,FGD5-AS1表达、A450值、划痕愈合率、侵袭数目、Bcl-2、CDK6表达降低,miR-129-5p表达、凋亡率、Bax、Caspase3蛋白表达升高(P<0.05).抑制miR-129-5p表达逆转了FGD5-AS1沉默对BC细胞各指标的影响(P<0.05).FGD5-AS1靶向负调控miR-129-5p表达,miR-129-5p靶向负调控CDK6表达.结论 沉默FGD5-AS1可能通过上调miR-129-5p来抑制CDK6蛋白的表达,从而抑制BC细胞增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为,促进细胞凋亡.
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