靶向抗原递呈细胞激活Flk1重组减毒鼠伤寒沙门菌的构建及其抑制树突状细胞凋亡的初步研究
Preliminary study on the establishment and role of dendritic cells activation-targeted recombinant attenuated Salmonella typhimurium strain
摘要目的 观察靶向抗原递呈细胞激活血管内皮生长因子受体-2(Flk1)的重组减毒鼠伤寒沙门菌对树突状细胞凋亡的抑制作用.方法 构建含Flk1与靶向抗凋亡基因BAK siRNA的重组质粒载体pFlk1-U6BAK,将其转化至减毒鼠伤寒沙门菌株中,携带pFlk1-U6BAK和pFlk1的重组减毒鼠伤寒沙门菌分别感染经体外培养的小鼠树突状细胞;Western blotting法检测树突状细胞Flk和BAK表达水平,MTT法检测树突状细胞增殖活性.结果 成功构建了含Flk1和靶向抗凋亡基因BAK siRNA的重组质粒载体pFlk1-U6BAK.经携带pFlk1-U6BAK的重组减毒鼠伤寒沙门菌感染后,树突状细胞在稳定表达Flk的同时,BAK表达水平显著降低;而经携带pFlk1-U6BAK的重组减毒鼠伤寒沙门菌感染后,树突状细胞增殖活性明显升高.结论 携带pFlk1-U6BAK的重组减毒鼠伤寒沙门菌可以在稳定表达Flk的同时,通过下调凋亡基因BAK表达水平而抑制树突状细胞凋亡,有望成为较为有效的抗肿瘤血管生成疫苗.
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