换一批XRCC1基因RNA干扰重组子克隆及序列分析
CONSTRUCTION AND SEQUENCE IDENTIFICATION OF XRCC1 RECOMBINANT FOR RNA INTERFERENCE
摘要[目的]构建XRCC1基因的发卡样siRNA(small interfere RNA)真核表达载体,为建立XRCC1缺陷的细胞株,及进一步研究XRCC1的功能奠定基础. [方法]根据GenBank提供的XRCC1基因cDNA序列及软件构建发卡样XRCC1基因siRNA逆转录病毒载体;选择酶切位点,将包括U6启动子和siRNA序列的片段切下,并亚克隆至入CMV当动子指导的pEGFP-C1荧光蛋白表达载体,构建XRCC1基因siRNA绿色荧光蛋白真核表达载体,构建载体通过荧光测序鉴定. [结果]通过分子克隆和琼脂糖凝胶电泳鉴定,成功构建了发卡样XRCC1基因siRNA逆转录病毒载体；经过亚克隆和琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定成功获得pEGFP-C1-XRCC1 siRNA真核表达载体. [结论]成功构建pEGFP-C1-XRCC1 siRNA真核表达载体,为建立XRCC1蛋白缺陷细胞株提供材料.
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发布时间
2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点基础研究发展计划（973计划）（973;2002CB512904）
国家自然科学基金（39970636）
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