换一批
换一批乙型肝炎病毒不同基因区RNA干扰抑制乙型肝炎病毒复制和表达的实验研究
siRNAs targeting different gene regions of hepatitis B viral efficiently inhibit HBV replication and HBsAg and HBeAg expression in vitro
摘要目的 针对乙型肝炎病毒(HBV)不同基因区设计siRNA,观察其对HBV表面抗原、e抗原分泌和HBV DNA复制的影响.方法 靶向HBV基因区S、C、X的siRNA分别转染可稳定分泌HBV颗粒的HepG2.2.15细胞,转染后72h,采用ELISA方法检测上清液中HBsAg、HBeAg的含量,Real-time PCR定量检测HBV DNA拷贝数.结果 靶向不同基因区的siRNA均能不同程度地抑制HepG2.2.15细胞HBsAg、HBeAg的分泌和HBV DNA的复制,其中S区siRNA对HBsAg呈现非常显著的抑制作用,抑制率为91.88％ (P＜ 0.01),对HBeAg表达的抑制作用较弱,抑制率为24.85％ (P＜0.05),对HBV DNA的抑制率为63.07％ (P＜0.01);C区siRNA对HBeAg和HBV DNA抑制作用较强,分别为54.77％(P＜0.01)和76.97％ (P＜ 0.01),但对HBsAg的表达无明显影响(P＞0.05)；X区siRNA对HBsAg和HBeAg、HBVDNA均有抑制作用,抑制率分别为90.83％ (P＜ 0.01)、34.85％ (P＜ 0.01)和70.31％ (P＜ 0.01).靶向不同基因区的mRNA对HBsAg、HBeA8、HBV DNA的抑制作用在一定的程度上存在剂量效应,而无关序列对HBsAg、HBeAs和HBVDNA的复制和表达几乎无干扰作用(P＞0.05).结论 靶向HBVC、S、X基因区的siRNA可特异、高效、稳定地抑制HBV的复制和表达,为应用RNA干扰治疗乙型肝炎病毒奠定了一定基础.
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主题词
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus)复制技术(Copying Processes)基因(Genes)抗原, 表面(Antigens, Surface)乙型肝炎e抗原(Hepatitis B e Antigens)
分类号
R512.6+2
栏目名称
实验技术及其应用
发布时间
2012-07-02
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