基因组DNA库和cDNA库的同时建立及计算机管理
Simultaneous construction and computer management for genomic DNA bank and cDNA bank
摘要目的 介绍一种快速简便地同时建立基因组DNA库和cDNA库的方法及详细步骤,并强调计算机管理的重要性.方法 采5ml外周血,其中4ml分成2份用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA;另1ml血分成4份用直接裂解全血的方法提取RNA和一步合成法进行cDNA的合成.结果 用该方法建立的库中每个基因组DNA样本平均可以做1 200次PCR反应,每个cDNA样本平均可以做190次荧光定量PCR反应.结论 对同一患者,用该方法可以既保存基因组DNA又保存cDNA,而且方法简便、实用,加上合理的计算机管理,可以快速准确地从众多的DNA中查找到自己需要的样品.
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