换一批
换一批脊髓灰质炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用
Establishment and application of poliovirus Real-time fluorescence quantitative RT-PCR detection method
摘要目的 在省级脊髓灰质炎(脊灰)实验室建立一种快速、灵敏、准确的脊灰病毒(Poliovirus,PV)型内鉴定(Intratypic Differentiation,ITD)及基因型鉴定的方法.方法 以PV衣壳蛋白(Capsid Protein) VP1编码区基因序列为目标,设计并合成引物和Taqman探针,建立实时荧光定量RT-PCR (Real-time RT-PCR,rRT-PCR)检测体系,并考察该方法的重复性、灵敏性和特异性.结果 该方法能快速、灵敏地鉴定出PV血清型及毒株类型,在1.0×108copies/μl～ 1.0×103 copies/μl检测范围之间有良好的线性关系,相关系数为0.993,最低检测限为1035CCID50/0.1 ml.结论 成功在省级实验室建立了PV的rRT-PCR检测技术,该技术特异性强,敏感性高,操作简便快速,适用于PV的型内鉴定和基因型鉴定,可应用于实验室诊断,为免疫策略快速提供依据.
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