用体外器官培养方法研究EDCs对新生小鼠睾丸的影响

Investigation of the effects of EDCs on neonatal mouse testis using vitro organ culture

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摘要目的通过已建立的小鼠睾丸体外培养系统,研究四种内分泌干扰物(Endocrine Disrupting Chemicals,EDCs)对男性内分泌系统的影响.方法将新生小鼠的睾丸组织在体外环境中培养24 h,而后在培养基中分别加入浓度为0.1μM,1μM,10 μM and 100 μM的四种(DEHP、MEHP、NP、p,p'-DDE)内分泌干扰物并培养72 h,同时设置对照组;培养结束后进行组织学观察,测定冻存培养基中睾酮和抑制素βB(INH-βB)的分泌水平,同时测定细胞色素P450侧链裂解酶(P450Scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、细胞色素P45017α-羟化酶(P450C17)和波形蛋白(vimentin)的基因表达情况.结果所有剂量组中睾酮的分泌水平均发生改变;P450Scc、3β-HSD、P450C17和INH-βB蛋白质的表达及mRNA水平均受到四种内分泌干扰物的影响(P＜0.05);DEHP和MEHP降低了波形蛋白的mRNA水平(P＜0.05),而NP和p,p'-DDE对波形蛋白没有显著影响(P＞0.05).结论本研究建立的体外培养新生小鼠睾丸模型中,所选的四种已知EDCs改变了两种睾丸激素水平,三种类固醇合成酶以及与支持细胞功能相关的波形蛋白的表达.