换一批应用动力学直接多肽反应试验检测化学物皮肤致敏性
Kinetic direct peptide reactivity assay for detecting skin sensitization of chemicals
摘要目的 评估动力学直接多肽反应试验(kinetic direct peptide reactivity assay,kDPRA)对化学物皮肤致敏性的鉴别能力.方法 选用已知皮肤致敏强度的31种化学物,将化学物用磷酸盐缓冲液或乙腈配制成1.25、2.5、5.0、10.0和20.0 mmol/L溶液,分别取40 μl上述溶液与120 μl的0.667 mmol/L半胱氨酸肽混合,同时设空白对照、溶剂对照、测试物对照和阳性对照(肉桂醛),在25℃条件下孵育10、30、90、150、210和1 440 min,作用相应时间后,每孔加入40 μl 3 mmol/L的单溴二胺作用5 min,在酶标仪上以390 nm的激发光和480 nm的发射光测定荧光强度;计算半胱氨酸肽的消耗率和速率常数,取6个时间点中最大对数速率常数(log kmax)作为评价指标,评价各种化学物的皮肤致敏性.结果 应用2,4-二硝基氯苯的3次测试获得log kmax分别为-0.39、-0.28、-0.31,结果均判定为1A类致敏物;对10种化学物的3次重复测试均能获得一致的致敏性分类;扩展对20种化学物测试的结果,6种化学物判为1A类,14种判为非1A类,所测31种化学物皮肤致敏性分类结果均与欧洲化学品管理局(European Chemicals Agency,ECHA)数据库一致.结论 该方法对化学物皮肤致敏性具有较好的鉴别能力.
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分类号
R994.6（毒物学《毒理学》）
栏目名称
DOI
10.20043/j.cnki.MPM.202411400
发布时间
2025-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家药品监督管理局化妆品风险评估重点实验室开放课题（KF2021013）
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