脑梗死继发皮质脊髓束华勒氏变性大鼠模型制备及标准化评估

Preparation and standardized evaluation of Waller's degeneration rat model of corticospinal tract

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摘要目的优化大鼠光化学法脑梗死的实验方法,制备稳定的脑梗死继发脊髓束华勒氏变性大鼠模型并进行标准化评估.方法通过光化学法建立SD大鼠大脑右侧运动皮层终末动脉永久性缺血性损伤模型(实验组).第一阶段实验组根据 45 只SD大鼠质量分为 3 组:A组,150～250g;B组,250～350g;C组,350～450g.每组再根据 5%玫瑰红B剂量随机平均分3个亚组:Ⅰ组,12.5mg/100g体重;Ⅱ组,20mg/100g体重;Ⅲ组,30mg/100g体重.第二阶段实验组在BⅡ组基础上,根据玫瑰红B的浓度分为 3 组:a组,5%;b组,7.5%;c组,10%;每组再根据注射时间随机平均分 3 个亚组:1 组,注射时间<1min;2 组,注射时间 1～2min;3 组,注射时间>2min.造模后 24h扫描MRI,28d扫描扩散峰度成像(Diffusional kurtosis imaging,DKI)后牺牲大鼠,取脑组织做常规HE、髓鞘LFB及免疫荧光GFAP染色.结果脑梗死继发脊髓束华勒氏变性大鼠模型制备的最佳参数组合为:SD大鼠体重 250～350g、5%玫瑰红B 20mg/100g体重、注射时间≥2min、冷光源探头距离暴露的颅骨大约 20mm、照射强度 300～320klx、照射时间 30min,该参数组合制备模型的 24h脑梗死阳性率、28d脑软化灶阳性率及 28d存活率均为 100%.结论本研究详细描述了光化学法脑梗死继发脊髓束华勒氏变性大鼠模型建立过程并进行标准化评估,为神经变性疾病研究提供了一种稳定、可靠的动物模型.