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2种不同面积培养皿对人脐带间充质干细胞收获量和生物学特性的影响

Effects of two different culture dish areas on the harvest volume and biological characteristics of mesenchymal stem cells

摘要目的 探讨2种不同面积培养皿对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)收获量和生物学特性的影响.方法 采集4条新鲜脐带,采用组织块法分离脐带组织,分别用底面直径15 cm(A组)和底面直径10 cm(B组)的培养皿进行贴壁培养,收集原代细胞,比较2组平均面积原代细胞收获量.每株细胞实验重复5次,取中间3个实验结果计算平均值.分别收集细胞培养至P1代和P2代,统计2组细胞收获量并绘制增殖曲线,检测表面标志物、三系分化潜能和免疫调节能力.结果 A组单位面积收获的原代细胞量[(29 030.00±568.30)cm-2]明显高于B组[(14 799.25±409.30)cm-2],差异有统计学意义(P<0.001).A、B组T淋巴细胞增殖[分别为(3.05±0.90)%、(3.00±1.23)%]均低于对照组[(13.36±2.11)%],差异均有统计学意义(P<0.05).A、B组P2代次的Th1型细胞因子TNF-α比例[分别为(9.96±4.45)%、(9.91±3.36)%]均低于对照组[(37.84±11.51)%],差异均有统计学意义(P<0.05).A、B组Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ[分别为(0.72±0.18)%、(0.78±0.32)%]均低于对照组[(3.09±0.70)%],差异有统计学意义(P<0.05).A、B组P2代次的Th17型细胞因子IL-17A[分别为(0.21±0.13)%、(0.20±0.08)%]均低于对照组[(1.88±0.37)%],差异均有统计学意义(P<0.05).A、B组CD4+CD25+FoxP3+细胞比例[分别为(2.41±0.32)%、(2.69±0.40)%]均高于对照组[(0.51±0.10)%],差异有统计学意义(P<0.05).结论 相同接种密度条件下,直径15 cm培养皿单位面积收获的原代细胞量更多,优化了培养过程的效率和经济性,减少了塑料制品的消耗,保护了环境.

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