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左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢超微结构及自噬相关基因表达的影响

Effects of Zuo Gui Pills on ovarian ultrastructure and expression of autophagy-related genes in mice with premature ovarian failure

摘要目的 观察左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢超微结构及自噬相关基因表达的影响.方法 取60只ICR小鼠,采用腹腔注射环磷酰胺方式建立卵巢早衰模型,将造模成功小鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组及左归丸低、中、高剂量组各12只,另选取12只ICR小鼠作为正常组.左归丸低、中、高剂量组分别给予13.65 g/kg、40.95 g/kg、122.85 g/kg左归丸浸膏灌胃,戊酸雌二醇组给予0.13 mg/kg戊酸雌二醇溶液灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均连续灌胃30 d.观察各组小鼠动情周期情况;ELISA法检测灌胃10 d、20 d血清抗苗勒管激素(AMH)水平和灌胃结束后血清AMH、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)水平;透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构;Western blot及qRT-PCR法分别检测卵巢组织中自噬相关基因Beclin-1、LC3 B、p62蛋白和mR-NA表达情况,并通过激光共聚焦显微镜对以上基因进行定位和定量分析.结果 与正常组比较,模型组小鼠动情周期紊乱;血清AMH水平呈持续下降趋势(P<0.05),血清E2水平明显降低(P<0.05),血清FSH水平明显升高(P<0.05);卵巢颗粒细胞内自噬小体增多;卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白和mRNA表达量均明显升高(P均<0.05),p62蛋白和mRNA表达量均明显降低(P均<0.05);卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白平均免疫荧光强度均明显增强(P均<0.05),p62蛋白平均免疫荧光强度明显减弱(P<0.05).与模型组比较,左归丸高剂量组及戊酸雌二醇组小鼠动情周期均明显改善;血清AMH、E2水平均明显升高(P均<0.05),血清FSH水平均明显降低(P均<0.05);卵巢颗粒细胞内自噬小体减少;卵巢组织中Beclin-1、LC3 B蛋白和mRNA表达量均明显降低(P均<0.05),p62蛋白和mRNA表达量均明显升高(P均<0.05);卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白平均免疫荧光强度均明显减弱(P均<0.05),p62蛋白平均免疫荧光强度均明显增强(P均<0.05).结论 左归丸可以改善卵巢早衰小鼠动情周期紊乱,调节卵巢储备、血清性激素水平以及卵巢组织自噬相关基因的表达,改善卵巢颗粒细胞超微结构并抑制自噬小体的产生,左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢的保护作用与抑制卵巢过度自噬相关.

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分类号 R-332
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.1008-8849.2023.02.001
发布时间 2023-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(81774362); 国家自然科学基金(81303004); 湖南省自然科学基金项目(2018JJ2290)
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