益气解毒方联合5-氟尿嘧啶介导NF-κB通路促进裸鼠结肠癌移植瘤凋亡效应的研究
Decoction for replenishing qi and removing toxin combined with 5-fluorouracil promotes apoptosis of colorectal cancer xenograft in nude mice through NF-κB signaling pathway
摘要目的 探讨益气解毒方联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)调节核转录因子-κB(NF-κB)通路对裸鼠结肠癌移植瘤凋亡效应的影响.方法 采用HT-29细胞左侧腋窝后部皮下注射方法构建BALB/c裸鼠结肠癌移植瘤模型,将成模鼠随机分为4组,每组10只.模型组给予生理盐水灌胃(1次/d),益气解毒方组给予15 g/kg益气解毒方灌胃(1次/d),5-Fu组给予5 mg/mL的5-Fu溶液腹腔注射(1次/2 d),联合组给予15 g/kg益气解毒方灌胃(1次/d)及5 mg/mL的5-Fu溶液腹腔注射(1次/2d),均连续干预25 d.观察移植瘤生长情况,HE染色观察移植瘤病理形态,Western blot法检测移植瘤组织中凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)]和NF-κB信号通路相关蛋白(NF-KBp65、IκK、IκB)表达情况,免疫组化法检测移植瘤组织中Bax、NF-KBp65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况,RT-qPCR法检测移植瘤组织中Bax、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、NF-κBp65 mRNA表达情况.结果 与模型组比较,各药物组移植瘤生长缓慢,移植瘤体积较小(P均<0.05),HE染色显示肿瘤组织发生不同程度的细胞破裂、坏死,瘤组织中Bax蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),Bcl-2、NF-κBp65、IκK、IκB蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);益气解毒方组和联合组瘤组织中Bax表达平均光密度值均明显升高(P均<0.05),5-Fu组和联合组NF-KBp65、TNF-α表达平均光密度值均明显降低(P均<0.05);5-Fu组、联合组瘤组织中Bax mRNA相对表达量和各药物组瘤组织中Caspase-3 mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05),益气解毒方组、联合组瘤组织中NF-κBp65 mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05).与益气解毒方组和5-Fu组比较,联合组移植瘤体积更小(P均<0.05),肿瘤组织破坏更明显,瘤组织中Bax蛋白相对表达量和Bax、Caspase-3 mRNA相对表达量均更高(P均<0.05),Bcl-2、NF-κBp65、IκK、IκB蛋白相对表达量均更低(P均<0.05);其中联合组瘤组织中Bax表达平均光密度值明显高于5-Fu组(P<0.05),NF-κBp65表达平均光密度值明显低于益气解毒方组(P<0.05),NF-κBp65 mRNA相对表达量明显低于5-Fu组(P<0.05).结论 益气解毒方与5-Fu联合使用可协同抑制结肠癌移植瘤的生长及诱导其凋亡,机制可能与下调Bcl-2、TNF-α表达,上调Bax、Caspase-3表达,抑制NF-κB信号通路有关.
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